Cell Meter 細(xì)胞增殖檢測試劑盒是一種靈敏的熒光法檢測試劑盒，以微板形式量化細(xì)胞并評估細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性。Cell Meter 細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用我們的Nuclear Green LCS1，一種專有的熒光染料，在與核酸結(jié)合時(shí)表現(xiàn)出強(qiáng)烈的熒光。核綠色LCS1的使用提高了細(xì)胞代謝、細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，這些細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性試驗(yàn)可能受到與細(xì)胞數(shù)量無關(guān)的細(xì)胞變化的影響。該試劑盒不需要細(xì)胞裂解、長時(shí)間孵育或去除細(xì)胞，它與高通量篩選兼容。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

概述

準(zhǔn)備細(xì)胞樣本，并根據(jù)需要處理細(xì)胞

去除細(xì)胞培養(yǎng)基

添加染料工作溶液

培養(yǎng)10分鐘

使用Ex/Em=490/525 nm的熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行分析

重要提示：在打開瓶子之前，將所有成分加熱到室溫。由于該試劑與核酸結(jié)合，應(yīng)將其作為潛在的誘變劑處理，并適當(dāng)謹(jǐn)慎處理。DMSO儲備液應(yīng)特別小心處理，因?yàn)橐阎狣MSO有利于有機(jī)分子進(jìn)入組織。

溶液配制

1.工作溶液配制

Nuclear Green LCS1工作溶液配制
向10 m L反應(yīng)緩沖液中加入25 µL的Nuclear Green LCS1，并充分混勻。

注：10 mL 足以進(jìn)行100次試驗(yàn)。為了獲得效果，Nuclear Green LCS1染料工作液應(yīng)及時(shí)、全部使用。

注：在- 20 ° C保存任何未使用的Nuclear Green LCS1 (成分A )。

操作步驟

以下方案僅用于指導(dǎo)，具體，請按照自己的實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整。

1.制備細(xì)胞樣本并按需處理細(xì)胞。

2.去除細(xì)胞培養(yǎng)基，將細(xì)胞用PBS清洗2次。
注意：去除細(xì)胞培養(yǎng)基是必須的，因?yàn)樗赡芨蓴_Nuclear Green LCS1的熒光。

3.可選：用PBS洗滌后，涉及多個(gè)時(shí)間點(diǎn)和樣品的實(shí)驗(yàn)可以在- 80 ° C保存幾天或進(jìn)行步驟4。

4.加入100 µ L的Nuclear Green LCS1染料工作液，室溫孵育10 ~ 60 min，避光。

5.使用Ex / Em = 490 / 525 nm ( Cutoff = 515 nm)的熒光酶標(biāo)儀檢測樣品熒光。