樣品實驗方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備尿素標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50μL）
2.添加尿素工作液（50μL）
3.在室溫或37°C孵育30-60分鐘
4.添加分析緩沖液II
5.讀取665 nm處的吸光度

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Assay Enzyme Mix儲備液（100X）：
將100μLddH2 O加入到測定酶混合物（組分A）的小瓶中以制備100X測定酶混合物儲備溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

2.1尿素標(biāo)準(zhǔn)
將1μL1.0M尿素標(biāo)準(zhǔn)品（組分D）加入999μLDPBS中以產(chǎn)生1.0mM標(biāo)準(zhǔn)尿素溶液（US7）。 取1.0mM尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液進行1：3連續(xù)稀釋，得到剩余的尿素標(biāo)準(zhǔn)溶液（US6-US1）。

3.工作溶液

將50μL重構(gòu)的測定酶混合物儲備溶液（100X）加入5mL測定緩沖液I（組分B）中以制備尿素工作溶液。 注意：尿素工作溶液應(yīng)及時使用，避光。 隨著儲存時間的延長，測定靈敏度會降低。 建議使用新鮮尿素工作溶液以獲得佳效果。