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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測試劑盒>>蛋白酶系列>> 酸性蛋白酶測試盒可見分光光度法

酸性蛋白酶測試盒可見分光光度法
  • 酸性蛋白酶測試盒可見分光光度法
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更新時間:2023-12-26 21:32:23瀏覽次數(shù):969評價

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貨號 BK-01S6624
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注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:酸性蛋白酶測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6624

產(chǎn)品分類:蛋白酶系列
商品介紹:

測定意義:

ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。

測定原理:

酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過測定其吸光度增加,來計算ACP活性。

自備儀器和樣品:

水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1瓶 QSG-7701細(xì)胞株 QSG-7701 低溫運輸和保存

腦心浸液瓊脂(BHIA) Brain Heart infusion Agar 250g

100mg 鮭魚精 DNA Deoxyribonucleic Acid Sodium Salt From Salmon Testes 4℃保存

50T 鼻疽假單胞菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

12塊 SDS-PAGE預(yù)制膠 Instant SDS-PAGE Gel 4℃保存

100mL TEA Buffer,0.2M,pH8.0  TEA Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

4次 大提柱式酵母DNAout  

2 ug pETBlue-2 pETBlue-2 低溫運輸,-20℃保存

七葉苷培養(yǎng)基 Esculin Medium 10

5mg 5- 溴 -4- 氯 -3- 葡萄糖苷 X-Gluc -20℃保存

500支 2.0 mL RNase-free 離心管  常溫

酸性蛋白酶測試盒可見分光光度法C1orf172  1號染色體開放閱讀框172抗體 規(guī)格: 0.2ml

Metallothionein 3  金屬硫蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

WNK4  WNK4抗體 規(guī)格: 0.1ml

TNK1  非受體型酪蛋白激Tnk1抗體 規(guī)格: 0.1ml

PEF1  調(diào)亡誘導(dǎo)因子家族蛋白PEF1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

FLG  絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlhuman Fibrinogen  羊抗人纖維蛋白原抗體 0.1ml

VAMP-2  囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlStreptococcus suis 2  2型豬鏈球菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mfn1  線粒體融合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlRGS4  神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

CARD12  凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體 規(guī)格: 0.2mlARMC3 (Cancer/testis antigen 81)  瘤/睪抗原81抗體 規(guī)格: 0.2ml

TXNRD1  硫氧環(huán)蛋白還原1抗體 規(guī)格: 0.2mlMCK10/CD167a/DDR1  神經(jīng)上皮酪激抗體(激10) 規(guī)格: 0.1ml

Nur77/GFRP  孤兒核受體蛋白Nur77抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-Guinea pig IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml 

 


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