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目錄:上海帛科生物技術(shù)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>蛋白酶系列>> 堿性蛋白酶測(cè)試盒可見分光光度法

堿性蛋白酶測(cè)試盒可見分光光度法
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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2023-12-26 20:53:09瀏覽次數(shù):861評(píng)價(jià)

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貨號(hào) BK-01S6628
堿性蛋白酶測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:抗生素檢定培養(yǎng)基8號(hào) 英文名稱:Antibiotic Agar NO.8 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素5號(hào) 英文名稱:Antibiotic NO.5 產(chǎn)品規(guī)格:250g 抗生素檢定培養(yǎng)基6號(hào) 英文名稱:Antibiotic Agar NO.6 產(chǎn)品規(guī)格:250g 麥迪、麥白檢定培養(yǎng)基(普通輕質(zhì)斜面培養(yǎng)基) 英文名稱:Wheat albomycin T

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:堿性蛋白酶測(cè)試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測(cè)方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6628

產(chǎn)品分類:蛋白酶系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。

測(cè)定原理:

在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,測(cè)定680nm吸光度增加速率,來計(jì)算AKP活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

20次 中草藥DNAout Herbal DNAOUT 常溫

50T 偏肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

1盒 X 光片(5×7英寸) X-Ray Film 避光保存

2 ug pKD1 pKD1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

液體沙氏培養(yǎng)基 Liquid Sabourand Medium 250g

1瓶 MDA-MB-157細(xì)胞株 MDA-MB-157 低溫運(yùn)輸和保存

月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth 250g

25U 脫羧 Tyrosine Decarboxylase  -20℃保存

1000mL TBS-Tween-20 (TTBS),20X   TBS-Tween-20 (TTBS),20X   常溫保存

100µL 兔抗His標(biāo)簽多抗,HRP標(biāo)記 Anti His-tag PAb,HRP-Labeled 4℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.5  Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.5  常溫保存

堿性蛋白酶測(cè)試盒可見分光光度法phospho-P53(Ser392)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1mlPSMD8  蛋白調(diào)解因子8抗體 規(guī)格: 0.2ml

GADD45B  生抑制DNA損傷基因GADD45β抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Monkey IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.3ml

HSPB2  熱休克蛋白B2抗體 0.1ml

DLC1/DLC8  胞漿動(dòng)力蛋白輕鏈1抗體 規(guī)格: 0.2ml

AD7C-NTP(human)  神經(jīng)絲蛋白抗體(人) 0.2ml

Goat Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/PE  PE標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

SP-D/PSPD  肺表面活性蛋白D抗體 規(guī)格: 0.1ml

PXMP1/ABCD3  過氧化物膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

FGF22  成纖維細(xì)胞生因子22抗體 規(guī)格: 0.2ml

PIWIL3  piwi樣3蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM 規(guī)格: 0.1ml 

 


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