直鏈淀粉是淀粉的一種主要形式,由α-D-葡萄糖單元通過α-1,4糖苷鍵連接而成,廣泛存在于植物中,尤其是谷物、薯類、豆類等。在食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域,直鏈淀粉的含量是評(píng)價(jià)產(chǎn)品質(zhì)量和性能的重要指標(biāo)之一。碘比色法因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于直鏈淀粉含量的測(cè)定。
該方法的基本原理是:在特定條件下,直鏈淀粉與碘形成穩(wěn)定的藍(lán)色絡(luò)合物,其顏色深淺與直鏈淀粉含量成正比。通過測(cè)量藍(lán)色絡(luò)合物在特定波長(如550nm和485nm)下的吸光度,可以計(jì)算出樣品中直鏈淀粉的含量。
樣品處理
稱取適量樣品,精確至 0.0001g,放入離心管中。加入適量氫氧化鈉溶液,攪拌均勻,在一定溫度下(如 30℃)水浴振蕩提取一段時(shí)間(如 30min)。提取完成后,離心或過濾,取上清液備用。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
準(zhǔn)確稱取一定量的直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品,用少量乙醇濕潤后,加適量氫氧化鈉溶液溶解,轉(zhuǎn)移至容量瓶中定容,配制成一系列不同濃度的直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液于比色管中,加入適量碘試劑,定容至刻度,搖勻,在一定溫度下顯色一段時(shí)間(如 15min)。以空白溶液為參比,在特定波長下(一般為 620nm)測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。以直鏈淀粉濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取適量處理后的樣品溶液于比色管中,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的步驟加入碘試劑顯色,測(cè)定吸光度。