【產(chǎn)品簡介】
產(chǎn)品名稱：α1酸性糖蛋白(α1-AGP)測定試劑盒說明書
英文名稱：α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
貨號：XG-E63210
需自備試劑和器材：
1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2． 自動(dòng)洗板機(jī)。
3.  37℃恒溫箱。
4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)**用多通道移液器。
5． 干凈的試管和 Eppendof 管。
6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。
9.  蒸餾水
10.  吸水紙

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。  
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min； 
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）備注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第 5 步封閉。 
5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min； 
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 
11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30min； 
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 
16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 F-TESTO ELISA Kit 游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 FP-S ELISA Kit 游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 FE3 ELISA Kit 游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 f-βhCG ELISA Kit 游離β絨毛膜(f-βhCG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Hp-IgG ELISA Kit 幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Hp-IgM ELISA Kit 幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體 HP-CagA-IgG ELISA Kit 幽門螺桿菌細(xì)胞毒素相關(guān)基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒
活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體 EL ELISA Kit 優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
AICAR甲?；D(zhuǎn)移酶抗體 SOST ELISA Kit 硬骨素(SOST)ELISA試劑盒
磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 IHH ELISA Kit 印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
ATP5E蛋白抗體 NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1 ELISA Kit 隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
ATP5G2蛋白抗體 IDO ELISA Kit 吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒
ATP6V0D2蛋白抗體 Shh-N ELISA Kit 音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒
ATP6V1B2蛋白抗體 SHH ELISA Kit 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
ATPIF1蛋白抗體 Inhbb ELISA Kit 抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
Attractin蛋白抗體 INHBA ELISA Kit 抑制素β-A(INHBA)ELISA試劑盒
磷酸化有絲分裂激酶B抗體 INH-B ELISA Kit 抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體 INH-A ELISA Kit 抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
ALKB蛋白抗體 INH ELISA Kit 抑制素(INH)ELISA試劑盒
乙酰酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體 AP ELISA Kit (AP)ELISA試劑盒

活性氧簇ROS抗體
磷酸化細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體
磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體
磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體
轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體
復(fù)制因子A蛋白2
磷酸化復(fù)制因子A蛋白2抗體
Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體
磷酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體
磷酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體
磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗體
磷酸化Rad51抗體
磷酸化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體
磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體
環(huán)指蛋白1抗體
原癌基因c-Met相關(guān)激酶抗體
磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)激酶抗體
腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體
軸突導(dǎo)向受體抗體
絡(luò)絲蛋白抗體
RUSC1抗體
RUSC2抗體
RAGEF2蛋白抗體
G蛋白偶聯(lián)受體RAB23抗體
G蛋白信號調(diào)節(jié)因子14抗體
核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體
磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體
磷酸化蛋白酶體PSMβ7抗體
根蛋白抗體
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白2抗體
維甲酸受體G抗體
α1酸性糖蛋白(α1-AGP)測定試劑盒說明書Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體
磷酸化Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體
環(huán)指蛋白87
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。