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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>測定試劑盒>>進(jìn)口測定試劑盒>> 48T/96T激活素A(ACVA)測定試劑盒免費(fèi)代測
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產(chǎn)品型號48T/96T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):462次
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產(chǎn)品名稱:激活素A(ACVA)測定試劑盒免費(fèi)代測
英文名稱:ACVA (Activin A) ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
貨號:XG-E63212
需自備試劑和器材:
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2. 自動洗板機(jī)。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時**用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實(shí)驗(yàn)步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)備注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
人激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ACVA (Activin A) ELISA Kit
人脂聯(lián)素(ADP/Acrp30)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit
人Agouti相關(guān)蛋白(AgRP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit
人血管生成素(ANG)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ANG (Angiogenin) ELISA Kit
人促血管生成素1(ANG1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit
人促血管生成素2(ANG2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit
人B細(xì)胞活化因子 (BAFF/CD257)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit
人腦源性神經(jīng)因子(BDNF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
人骨成型蛋白2 (BMP-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit
人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit
人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit
人上皮型鈣黏蛋白 (E-Cad)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit
人碳酸酐酶IX (CA9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit
激活素A(ACVA)測定試劑盒免費(fèi)代測巴卡丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品)Baccatin III :27548-93-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Cilostazol :73963-72-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
多烯*無水/*(標(biāo)準(zhǔn)品)Docetaxel anhydrous :114977-28-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
*鈉Fosfomycin sodium :26016-99-9 質(zhì)量規(guī)格:>96%
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Levetiracetam :102767-28-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
*Olanzapine :132539-06-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
白藜蘆醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Resveratrol :501-36-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Tacrolimus /FK506 monohydrate :109581-93-3 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
重長春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)Vinorelbine Tartrate :125317-39-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
乙酰*Acetylspiramycin :24916-51-6 質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyclophosphamide :6055-19-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
格列吡 Glipizide :29094-61-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
鹽酸*Ambroxol HCl :23828-92-4 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
D-半乳糖醛酸(標(biāo)準(zhǔn)品)D-Galacturonic acid :91510-62-2 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定;一水物
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Duloxetine hcl :136434-34-9 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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