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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時(shí)間：2022-05-19 11:02:24瀏覽次數(shù)：373
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商品介紹：
名稱 DC細(xì)胞
產(chǎn)品概述
DC細(xì)胞，即樹突狀細(xì)胞（Dendritic Cell）是正常人體內(nèi)存在的一種具有大的抗原提呈功能的一類特殊的細(xì)胞，被喻為機(jī)體的“天然佐劑"。2011年10月3日，瑞典卡羅琳醫(yī)學(xué)院在斯德哥爾摩宣布，2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予加拿大科學(xué)家拉爾夫·斯曼、生于盧森堡的法國籍科學(xué)家朱爾斯·霍夫曼以及美國科學(xué)家布魯斯·博伊特勒，以表彰他們?cè)诿庖邔W(xué)領(lǐng)域取得的革命性研究成果。其中，斯曼(RalphM·Steinman)教授，因其在免疫系統(tǒng)領(lǐng)域以及樹突狀細(xì)胞(Dendritic cell簡稱DC)等一系列研究發(fā)現(xiàn)，獨(dú)享獎(jiǎng)金的一半，另外一半由其他兩位科學(xué)家分享。被譽(yù)為“DC細(xì)胞之父"的斯曼教授在2006年就查出胰腺癌晚期。在醫(yī)學(xué)上，晚期胰腺癌的惡化程度高，生存期不會(huì)超過6個(gè)月。然而，斯曼教授正是在接受了以他自己的研究成果“樹突細(xì)胞"(DC細(xì)胞)為依據(jù)的細(xì)胞免疫治療后，成功地將生命延長。
DC細(xì)胞抗腫瘤機(jī)制如下：
a)DC可以高表達(dá)MHC-Ⅰ類和MHC-Ⅱ類分子，MHC分子與其捕獲加工的腫瘤抗原結(jié)合，形成肽-MHC分子復(fù)合物，并遞呈給T細(xì)胞，從而啟動(dòng)MHC-I類限制性CTL反應(yīng)和MHC-Ⅱ類限制性的CD4+Thl反應(yīng)。同時(shí)，DC還通過其高表達(dá)的共刺激分子(CD80/B7-1、CD86/B7-2、CD40等)提供T細(xì)胞活化所必須的第二信號(hào)，啟動(dòng)了免疫應(yīng)答。
b)DC與T細(xì)胞結(jié)合可大量分泌IL-12、IL-18激活T細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)CTL生成，主導(dǎo)Th1型免疫應(yīng)答，利于腫瘤清除；激活穿孔素P顆粒酶B和FasL/Fas介導(dǎo)的途徑增NK細(xì)胞毒作用；
c)DC分泌趨化因子(Chemotactic Cytokines，CCK)專一趨化初始型T細(xì)胞促進(jìn)T細(xì)胞聚集，增了T細(xì)胞的激發(fā)。保持效應(yīng)T細(xì)胞在腫瘤部位長期存在，可能通過釋放某些抗血管生成物質(zhì)(如IL-12、IFN-γ)及前血管生成因子而影響腫瘤血管的形成。上述CCK進(jìn)一步以正反饋旁分泌的方式活化DC，上調(diào)IL-12及CD80、CD86的表達(dá)；同時(shí)DC也直接向CD8+T細(xì)胞呈遞抗原肽，在活化的CD4+T細(xì)胞輔助下使CD8+T細(xì)胞活化，CD4+和CD8+T細(xì)胞還可以進(jìn)一步通過分泌細(xì)胞因子或直接殺傷，增機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答。
DC刺激免疫反應(yīng)有以下特點(diǎn)：
1.樹突狀細(xì)胞（DC)是人體內(nèi)功能的專職抗原遞呈細(xì)胞，DC相當(dāng)于信使，將抗原信息傳遞給T細(xì)胞，并具有活化T細(xì)胞的功能，很少量就可以激發(fā)大的T細(xì)胞反應(yīng)。
2.可致敏輔助T細(xì)胞的多種細(xì)胞因子，顯著刺激初始型T細(xì)胞增殖，以激活體內(nèi)靜止?fàn)顟B(tài)的初始型T細(xì)胞（而巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞僅能刺激已活化的或記憶性T細(xì)胞）。
3.幫助重建腫瘤患者對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視功能。機(jī)體的免疫系統(tǒng)具有完備的監(jiān)視功能，但腫瘤細(xì)胞對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)有抵抗和抑制作用，使得免疫細(xì)胞不能識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞。在DC疫苗培養(yǎng)中用腫瘤抗原誘導(dǎo)DC使其致敏后，可將其抗原信息傳遞給T細(xì)胞，使T細(xì)胞重新識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號(hào) |
1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 免疫細(xì)胞及干細(xì)胞 | BJ-X97749 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
| 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬古酶素10ml 30 支/盒 忍冬木層孔菌
齒雙歧桿菌 海洋海棲菌
克柔念珠菌ATCC6258凍干粉 白僵菌
戴爾根霉 威爾酵母
立枯多核菌 真線側(cè)耳
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大鼠單胺氧化酶(MAO)elisa分析檢測試劑盒
大鼠大內(nèi)皮素1elisa分析檢測試劑盒
大鼠催乳素(PRL)elisa分析檢測試劑盒
大鼠催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測試劑盒
DC細(xì)胞氧化酶（XOD）測試盒
氧化酶（XOD）試劑盒
氧化酶EC1.17.3.2 1 KU/瓶
氧化酶XOD測試盒 50管/48樣 比色法
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T
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