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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來(lái)的細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，從機(jī)體分離出來(lái)到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔羊膜間質(zhì)分離自胎盤(pán)組織；胎盤(pán)（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚(yú)類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤(pán)。羊膜是胎盤(pán)的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)，其光滑，無(wú)血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔羊膜間質(zhì)采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)"，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來(lái)的有限細(xì)胞系、無(wú)限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無(wú)限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問(wèn)題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin G segme of Fc receptor II (Fc gamma R II /CD32) ELISA Kit G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒

HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Equinegrowthhormone,GHELISA試劑盒馬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母β1，3D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MouseC-PeptideELISAKit小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠腱蛋白(CHRD)ELISA試劑盒 ，英文名： CHRD ELISA Kit

Mouse tumor markers (CA724) ELISA Kit 小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒

Ratai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFGF-10(Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10)ELISAKit大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

Ratosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CREG1重組小鼠 CREG / CREG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

睪素2(TIC2)重組蛋白 Recombinant Testican 2 (TIC2)

MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD200R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200R / OX2-R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔羊膜間質(zhì)細(xì)胞睪素2(TIC2)重組蛋白 Recombinant Testican 2 (TIC2)

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CREG1重組小鼠 CREG / CREG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD200R1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD200R / OX2-R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MAPK12重組人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面，紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說(shuō)明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。