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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

?小鼠鼻黏膜上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu)，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同，鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分，有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部，有發(fā)達的上皮纖毛，它們可向咽部擺動，黏著有塵粒、細菌的黏液排向咽部，終將它們排出體外。此外，此部分有豐富的血管與腺體，對吸入的空氣有加溫和濕潤作用。嗅部黏膜范圍較小，主要位于鼻腔頂部。它含有一種專司嗅覺的嗅細胞及嗅腺，它們分泌能溶解到達嗅區(qū)的含氣味的微粒，刺激嗅細胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺，而且還由于嗅細胞具有不同的受體，可分別接受不同化學(xué)分子的刺激，因此可產(chǎn)生不同的嗅覺。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Explicit peptide (extein) ELISA Kit 人外顯肽(extein)ELISA試劑盒

HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 人橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠ADM2(ADM2)ELISA試劑盒 ，英文名： ADM2 ELISA Kit

Mouse bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒

MouseEmbryonicStemMESPU30,M30ELISAKit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumahrombomodulin,TMELISAKit人血栓調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格：48T/96T

通用型羊關(guān)節(jié)炎腦炎病毒(AhritisEncephalitisVirus)試劑盒20次

ELISAKitHSP-40大鼠熱休克蛋白40規(guī)格：48T/96T

TGFB1重組小鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標簽) Protein

6(KLK6)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)

BCL2L11重組人 BCL2L11 / Bim 蛋白 (His 標簽) Protein

GLA Protein Human 重組人 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白 (His 標簽)

IL21 Protein Canine 重組狗 IL21 / Interleukin 21 蛋白

小鼠鼻黏膜上皮細胞6(KLK6)重組蛋白 Recombinant Kallikrein 6 (KLK6)

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IL21 Protein Canine 重組狗 IL21 / Interleukin 21 蛋白

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原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。