細(xì)胞:AVV-293細(xì)胞
中文名稱:人胚腎細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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決定現(xiàn)代細(xì)胞特征的演化關(guān)鍵
利用計(jì)算機(jī)仿真的方式,建構(gòu)了核膜上的分子結(jié)構(gòu),可能提供了研究生物體是如何從簡單的原核細(xì)胞,演化發(fā)展至復(fù)雜真核細(xì)胞的線索。
打從遠(yuǎn)古時代的簡單生物開始,細(xì)胞得從像細(xì)菌等單一原核細(xì)胞,逐漸演化至復(fù)雜的真核細(xì)胞,來適應(yīng)環(huán)境的需求,其中最_明顯的區(qū)別特征,就是所謂的內(nèi)膜系統(tǒng)的產(chǎn)生。
真核細(xì)胞因此借著這樣的核膜,區(qū)隔了具有遺傳訊息的DNA,不過由于相關(guān)結(jié)構(gòu)并沒有辦法以X光結(jié)晶學(xué)的方式,呈現(xiàn)真實(shí)的分子,因此這類演化的過程,一直是個迷團(tuán)。
2000年時發(fā)現(xiàn)核膜上的核孔復(fù)合體,是由30個蛋白次分子所構(gòu)成,利用計(jì)算機(jī)同源分析法的方式,借著其中主要的7個蛋白次分子,架構(gòu)出核孔的三度立體空間,因而發(fā)現(xiàn)其中兩個阿法線圈型、3個貝他螺線型,以及3個以阿法線圈型為起始,貝他螺線型為終止的結(jié)構(gòu),幾乎是所有真核細(xì)胞的演化上特征。