細(xì)胞：UMR108細(xì)胞
中文名稱：大鼠骨肉瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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造成細(xì)胞融合的蛋白質(zhì)，細(xì)胞融合在生物界很常見，但是機(jī)理并不清楚。這結(jié)果能幫助尋找用干細(xì)胞或含有修復(fù)基因的正常細(xì)胞對(duì)破損細(xì)胞進(jìn)行融合修復(fù)的方法。
盡管之前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)幫助病毒找到宿主細(xì)胞并進(jìn)行融合的蛋白質(zhì)，但是以上結(jié)果首_次找到在一般動(dòng)植物中驅(qū)動(dòng)這一過程的蛋白質(zhì)。
首先在線蟲C.elegans細(xì)胞膜上發(fā)現(xiàn)了可能的融合蛋白EFF-1。為了驗(yàn)證EFF-1在細(xì)胞中的作用，將這一蛋白放入實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的線蟲細(xì)胞中。很快他們發(fā)現(xiàn)EFF-1促進(jìn)了細(xì)胞融合，形成有多個(gè)核的巨型細(xì)胞。
此外，所有融合細(xì)胞都必須含有EFF-1蛋白。EFF-1還能造成細(xì)胞的“半融合”--細(xì)胞膜結(jié)合到一起，而內(nèi)部的細(xì)胞質(zhì)不混合。這一半融合過程在病毒和細(xì)胞中都存在。
以上發(fā)現(xiàn)能幫助了解人類很多重要器官的形成過程。構(gòu)成我們?nèi)种惑w重的長纖維狀骨骼肌就是細(xì)胞融合的結(jié)果。
理論上能利用這一過程進(jìn)行細(xì)胞修復(fù)。但他們也表示含有多個(gè)核的細(xì)胞可能造成癌癥。并且也尚未在人類體內(nèi)找到類似EFF-1的蛋白質(zhì)。
