細(xì)胞:BAEC細(xì)胞
中文名稱:牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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一個(gè)新的成熟干細(xì)胞來源,這些干細(xì)胞具有分化成各種類型細(xì)胞的潛力。
如果經(jīng)過培育這些細(xì)胞能夠增殖,并且在動(dòng)物和人類研究中被認(rèn)為是安全有效的,那么將來會(huì)根據(jù)需要為許多疾病提供所需組織的來源,包括末梢神經(jīng)疾病、帕金森氏病和脊髓損傷。
毛nang作為成熟干細(xì)胞的來源已眾所_周知。采用人類胚胎干細(xì)胞培育方法,從人類組織合作網(wǎng)絡(luò)獲取的頭皮組織中,分離并培育出一種新型的多功能成熟干細(xì)胞。
這些多功能干細(xì)胞以聚集的形式生長,研究人員稱之為毛球。當(dāng)這些來自于毛球的“生”的細(xì)胞在不同生長因子作用下進(jìn)行培育時(shí),研究人員可以讓這些干細(xì)胞分化成多種系統(tǒng)細(xì)胞,包括神經(jīng)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和黑素細(xì)胞(皮膚色素細(xì)胞)。
這些分化的細(xì)胞都有各自系統(tǒng)特_有的標(biāo)記,并正確發(fā)揮各自的功能。例如,在黑素細(xì)胞生長因子培養(yǎng)下的細(xì)胞經(jīng)過14天后,20~40%的細(xì)胞顯示出黑素細(xì)胞所特_有的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),并且表達(dá)色素細(xì)胞特_有的生物標(biāo)記。
將細(xì)胞植入到人造皮膚中后,這些細(xì)胞就可以產(chǎn)生黑色素,并對(duì)來自正常上皮細(xì)胞的化學(xué)信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)。
經(jīng)過14天神經(jīng)元(不存在于皮膚或毛發(fā))生長因子培養(yǎng)的干細(xì)胞,有10%會(huì)長出樹突,這是神經(jīng)細(xì)胞特_有的延伸方式,并有神經(jīng)元蛋白的表達(dá)。這些細(xì)胞含有神經(jīng)遞質(zhì)谷氨_酸,但沒有監(jiān)測到多巴胺這種神經(jīng)遞質(zhì)。
80%的干細(xì)胞經(jīng)過肌肉生長因子培養(yǎng)后分化成平滑肌細(xì)胞。將這些細(xì)胞放到膠原基質(zhì)中,它們也會(huì)產(chǎn)生收縮。
總的來說,研究人員證明,利用人類胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)模式,可以從人類毛nang中分離培養(yǎng)出一種新的多功能成熟干細(xì)胞。
盡管研究還處于開始階段,但結(jié)果證明,人類毛nang可以為我們提供有效的、不同種類的干細(xì)胞資源。目前,研究人員正在為從毛nang細(xì)胞中分離其它類型細(xì)胞做研究,并在動(dòng)物模型上檢驗(yàn)這些細(xì)胞。