細(xì)胞：FRhK-4細(xì)胞
中文名稱：恒河猴胚腎細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
角化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄揭示細(xì)胞分化及功能
鑒別加速成長的和衰老的角化細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄有助于揭示細(xì)胞的分化、干擾素信號和Notch信號通路。
表皮的角化細(xì)胞由增殖細(xì)胞轉(zhuǎn)變成早期和晚期分化層期間，在正常皮膚的角質(zhì)層凋亡前，經(jīng)歷了高度的形態(tài)學(xué)和分子水平上的變化。角質(zhì)層的形成對于皮膚正常的抵御感染功能至關(guān)重要。
在嫩或老的皮膚角化細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄過程監(jiān)管細(xì)胞分化，及保持表皮厚度以抵抗感染的防御機(jī)制，但目前對這一過程了解甚少。
進(jìn)一步說，因?yàn)樵谄つw表面，細(xì)胞的最終分化是其復(fù)制頂點(diǎn)不可逆損失的一個(gè)特征，這個(gè)過程可以看作是衰老的一種形式。
但是目前一個(gè)完整的衰老角化細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄圖象尚不能勾勒出分化和衰老的界限。為填補(bǔ)這項(xiàng)空白，我們利用試管中球形角化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄分析儀來培養(yǎng)增殖細(xì)胞，早期和晚期流式細(xì)胞或正經(jīng)歷復(fù)制性衰老的角化細(xì)胞。
球形基因表達(dá)圖譜表明早期流式角化細(xì)胞同增殖細(xì)胞有些類似，而同晚期細(xì)胞差別很大，同樣與復(fù)制性衰老細(xì)胞存在顯著差異。流式角化細(xì)胞和復(fù)制性衰老細(xì)胞有一些相同的監(jiān)管分化的基因，而后者在干擾素信號和炎癥通路上的基因表達(dá)水平更高。
這些結(jié)果為研究復(fù)制性衰老和部分基因參與分化的角化細(xì)胞的自我轉(zhuǎn)錄程序提供了新的見解。此外，角化細(xì)胞衰老的監(jiān)控機(jī)制可能包括干擾素信號通路的參與，而該通路體現(xiàn)了細(xì)胞保護(hù)皮膚免受感染的重要作用。
