細(xì)胞：H441細(xì)胞
中文名稱：人肺腺癌細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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由于有潛力生成一些具有特定功能的特化細(xì)胞，干細(xì)胞在醫(yī)學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域具有重要的價值。干細(xì)胞生成這些分化細(xì)胞的能力對于機(jī)體的正常維持、生長及修復(fù)至關(guān)重要。
許多的組織具有兩種干細(xì)胞群：一種很少分裂，稱作為靜息干細(xì)胞；另一種更易于增殖，稱作為始發(fā)態(tài)干細(xì)胞(primed stem Cell)。
無論它們的增殖頻率如何，人類的大多數(shù)干細(xì)胞都不會直接生成分化的子細(xì)胞;它們會生成一種中間增殖細(xì)胞群即TACs。
毛nang是生成毛發(fā)的一種微小器官，其形成狹窄毛nang管腔向下伸入到皮膚里。毛nang不斷地在生長、破壞和靜息狀態(tài)之間循環(huán)。當(dāng)進(jìn)入到生長期時，始發(fā)態(tài)干細(xì)胞群總是首先分裂并生成TACs，這些TACs在毛nang中向下聚集。
始發(fā)態(tài)干細(xì)胞增殖為下一輪的毛發(fā)生長創(chuàng)造了條件，確保了隨時間損失的毛發(fā)能夠被替換。增殖TACs則生成了毛干，以及皮膚下毛發(fā)周圍的所有細(xì)胞，這些細(xì)胞構(gòu)成了毛nang。
有時候干細(xì)胞會打開開關(guān)分裂生成子細(xì)胞，有時候則會關(guān)閉開關(guān)維持在靜息狀態(tài)。直到現(xiàn)在科學(xué)家們?nèi)晕赐阓全了解是什么引起了這些細(xì)胞在活化和靜息狀態(tài)之間切換。
