細(xì)胞:U-251 MG細(xì)胞
中文名稱:人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
過渡擴(kuò)充細(xì)胞精心調(diào)控干細(xì)胞激活和組織再生;
通過敲除成年小鼠毛nang中的負(fù)責(zé)基因使得TACs無法生成Sonic Hedgehog蛋白。由此,毛nang干細(xì)胞和它們TACs的增殖均受到了影響。他們進(jìn)一步證實(shí)靜息干細(xì)胞群增殖需要Sonic Hedgehog。
令人驚訝的是,當(dāng)Hsu阻斷靜息干細(xì)胞響應(yīng)Sonic Hedgehog的能力時(shí),毛發(fā)生長(zhǎng)繼續(xù)進(jìn)行,但毛nang變短,每經(jīng)歷一輪毛發(fā)周期,靜息和始發(fā)態(tài)干細(xì)胞群均數(shù)量減少,直至毛發(fā)完_全無法再生。
這些特征與男性脫發(fā)中發(fā)生的事件極其地相似。盡管這種機(jī)能紊亂的根源有可能是在Sonic Hedgehog的上游,這一研究提供了關(guān)于脫發(fā)現(xiàn)象的一些新見解,從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看對(duì)于開發(fā)出新的療法具有重要的意義。
TACs是許多不同的干細(xì)胞譜系的一個(gè)階段,研究斷定盡管精確的機(jī)制有可能有所差異,在我們的血液和腸等其他組織中TACs有可能發(fā)揮了相似的作用。
在大多數(shù)成人組織中,我們的干細(xì)胞必須能夠快速響應(yīng)損傷。通過利用TACs作為變阻器,可以嚴(yán)格地調(diào)控這一過程確保生產(chǎn)適當(dāng)數(shù)量的新組織來修復(fù)損傷。因此,不可以再將TACs視作是一種干細(xì)胞譜系的被動(dòng)中間體,而是協(xié)調(diào)組織再生的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)中心。