細胞：H522細胞
中文名稱：人肺腺癌細胞
生長特性：貼壁細胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；)
利用試管嬰兒中被遺棄的胚胎來產(chǎn)生正常的干細胞系，在胚胎發(fā)育到5—6天后，就能從中收集到一團特殊的細胞—內(nèi)細胞團。
然后在培養(yǎng)皿中經(jīng)過培養(yǎng)，這些內(nèi)細胞團能發(fā)育成胚胎干細胞系，在合適的條件下這些胚胎可以再生成新的干細胞，也可以分化成心臟細胞、肝臟細胞、腦細胞等不同的細胞類型。
在這種干細胞形成的過程中科學(xué)家面臨的最大問題是，已形成的干細胞系可能發(fā)生變異，必須不斷合成新的干細胞系。
而克隆干細胞的過程比獲取正常胚胎干細胞更加復(fù)雜，難度也更大?？茖W(xué)家一般從皮膚細胞等成人細胞中提取DNA，然后將提取的DNA注入事先移去DNA的卵細胞中，于是卵細胞開始像正常胚胎那樣分裂，經(jīng)過一段時間的發(fā)育，內(nèi)細胞團形成，再利用內(nèi)細胞團培養(yǎng)出干細胞。
已經(jīng)成功地利用克隆的老鼠胚胎獲得干細胞，但在人類實驗中并沒有獲得成功。與自然受精的胚胎不同，克隆胚胎很難存活一個星期即5—6天左右，而只有活這么長時間的胚胎才能形成干細胞所需的內(nèi)細胞團。
了解克隆過程后，我們就會知道并不是每個卵細胞都能成功地克隆出干細胞，因此存在一個成功率的問題，而科學(xué)家們所追求的就是利用最少的卵細胞克隆出最多的干細胞系；
