2015 08-03

網(wǎng)狀纖維染色－Wider染色法

網(wǎng)狀纖維染色－Wider染色法：可以用來顯示病變組織網(wǎng)狀支架的破壞情況。特別是在腫瘤病理診斷中，網(wǎng)狀纖維染色對(duì)于鑒別來源于上皮組織和間葉組織的惡性腫瘤具有重要價(jià)值。細(xì)胞染色步驟：①組織切片脫蠟至水。1...

2015 07-31

使用濃度對(duì)熒光PCR結(jié)果的影響

使用濃度對(duì)熒光PCR結(jié)果的影響：ELISA試劑盒SYBRGreenI的使用濃度是影響實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵因素，如果SYBRGreenI的濃度不飽和會(huì)使熒光信號(hào)不能反應(yīng)產(chǎn)物量的變化。而過高濃度則會(huì)抑制PC...

2015 07-27

免疫熒光組織化學(xué)的檢查方法

檢查抗原法：此法是免疫組織化學(xué)zui早使用的方法，用熒光素標(biāo)記已知特異性抗體，直接與組織細(xì)胞中相應(yīng)抗原結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見抗原存在部位呈現(xiàn)特異性熒光。此法特異性強(qiáng)，快速而簡(jiǎn)便，但是，由于一種熒光抗...

2015 07-24

非特異性熒光染色的消除

組織的非特異性熒光染色機(jī)制很復(fù)雜，其產(chǎn)生的原因主要有：一部分熒光素末與蛋白質(zhì)結(jié)合，形成了聚合物和衍化物，不能被除去；抗體以外的血清蛋白與熒光素結(jié)合形成熒光素脲蛋白與組織成分結(jié)合；除被檢抗原以外，組織中...

2015 07-22

原位雜交組織化學(xué)探針對(duì)照

已知陽性組織和已知陰性組織對(duì)照用探針在已知含靶核酸序列的陽性組織和已知不含靶核酸序列的陰性組織標(biāo)本上進(jìn)行原位雜交，應(yīng)分別得到陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。如果已知陽性組織出現(xiàn)陰性結(jié)果，則應(yīng)對(duì)探針的制備及原位雜交...

2015 07-20

原位雜交組織切片技術(shù)

冰凍切片在原位雜交中以冰凍切片zui常用。切片時(shí)，要盡量避免RNA酶污染，操作時(shí)需戴手套，使用70％酒精擦洗工作臺(tái)、切片機(jī)刀架、搖柄和載物臺(tái)等手常接觸的部位以及其他器械。切片厚度可根據(jù)具體情況而定。如...

2015 07-17

膠體金標(biāo)抗體的染色方法

利用兩種不同直徑的膠體金顆粒標(biāo)記兩種第二抗體，在電鏡下進(jìn)行兩種不同抗原的亞細(xì)胞定位?；驹瓌t：首先需購(gòu)買擬研究的兩種抗原的特異性抗體，以及不同直徑金顆粒標(biāo)記的相應(yīng)第二抗體，然后在同一張載網(wǎng)上分別或同時(shí)...

2015 07-15

間接免疫熒光法操作步驟

間接法又稱為熒光抗-抗體法?需要兩種抗體參與，即一抗和二抗(熒光素標(biāo)記)。一抗對(duì)標(biāo)本中的抗原來說起抗體的作用，但對(duì)熒光標(biāo)記的二抗來說又起著抗原作用。–可用來檢測(cè)標(biāo)本中未知抗原，也可檢測(cè)血清中未知抗體。...

2015 07-13

熒光抗體染色間接法

間接法（1）切片固定后用毛細(xì)滴管吸取經(jīng)適當(dāng)稀釋的免疫血清滴加在其上，置于染色盒中保持一定的濕度，37℃作用30min。然后用0.01mol/lpH7.2PBS洗兩次，10min，用吸水吸去或吹干余留的...

2015 07-10

抗原與抗體的結(jié)合作用

抗原與抗體的結(jié)合作用抗體（Ab）和抗原(Ag)的交互作用與經(jīng)典的質(zhì)量動(dòng)力反應(yīng)學(xué)描述的雙分子反應(yīng)相似：[Ag]+[Ab]游離抗原和游離抗體可逆地反應(yīng)形成抗原-抗體復(fù)合物。重排等式可以得到一個(gè)親和力（平衡...

2015 07-08

免疫組化非特異性染色的問題解決

①是否有效地去除了內(nèi)源性酶和*。應(yīng)注意的是，并不是每一種組織均需要進(jìn)行此步驟，但對(duì)于內(nèi)源性酶或*豐富的組織，如肝臟、腎臟等，需考慮此原因。處理的方法為：滅活堿性磷酸酶：zui常用的方法是將左旋咪唑（2...

2015 07-06

免疫組化的結(jié)果分析

DAB顯色時(shí)間如何把握？1.DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間，到出現(xiàn)淺棕色本底時(shí)即可沖洗。2.DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色，這很可能說明你的抗體濃度過高或...

2015 07-03

環(huán)境條件影響*活性強(qiáng)弱的實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)步驟1.*的提取取已發(fā)芽的水稻或小麥種子（幼芽長(zhǎng)3～4cm）20粒，放在研缽中研磨，勻漿用100ml水分多次沖洗，集中于150ml三角瓶并充分?jǐn)嚢?、靜置1小時(shí)后，過濾入另一三角瓶，濾液中即含有*，...

2015 07-01

寡核苷酸與抗體的結(jié)合

寡核苷酸與抗體的結(jié)合連接用的抗體可以是特異性一抗，也可以是第二抗體或其他的連接二抗，如抗（Dig）、抗熒光素（FITC）或抗*（biotin）二抗。1．抗體的脫鹽和活化首先對(duì)抗體免疫球蛋白進(jìn)行脫鹽，然...

2015 06-29

培養(yǎng)基的質(zhì)量要求

對(duì)每一個(gè)批次產(chǎn)品取適量樣品進(jìn)行微生物污染的測(cè)試。按批量的不同選擇適量的培養(yǎng)基在適當(dāng)條件下培養(yǎng)，測(cè)定其微生物污染。生產(chǎn)商應(yīng)根據(jù)每種平板或液體培養(yǎng)基的數(shù)量，規(guī)定或建立其污染限值，并記錄培養(yǎng)基成分、制備要素...

2015 06-26

ELISA常見問題及處理對(duì)策

可能原因解決方法ELISA試劑孵育的時(shí)間沒有按說明書操作確定*化抗體，連接的HRP試劑或鏈霉親和素-HRP使用的時(shí)間是否適當(dāng)。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑混用重新檢查試劑的標(biāo)簽，確認(rèn)所有組分都屬于正使用...

2015 06-24

病理學(xué)展片與脫蠟技術(shù)

展片與撈片展片水溫應(yīng)在42℃至47℃之間，這主要和包埋蠟的熔點(diǎn)有關(guān),水溫過高，會(huì)引起組織細(xì)胞散開，水溫過低，切片皺摺無法攤平。包埋蠟中如有二甲苯，也會(huì)造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子，一碰到熱...

2015 06-19

建立細(xì)胞系（或株）的要求

什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長(zhǎng)期培養(yǎng)，特別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說明：1、組...

2015 06-17

曲霉素ELISA試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)

曲霉素ELISA試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)●快速——只需要20分鐘●檢測(cè)范圍：2.0--100ng/ml（ppb）●可半定量和定量分析●可分析單個(gè)樣品，也可成批分析樣品（用于更經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)）●操作簡(jiǎn)便易處理，作用效...

2015 06-16

ELISA試劑盒標(biāo)本的采取和保存

標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部...