固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù)，需以洗刷操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分別開來，以保證ELISA測(cè)定的特異性。因而，洗板關(guān)于ELISA測(cè)定來說，也是極點(diǎn)要害的一步。

以HRP作為符號(hào)酶的ELISA試劑盒中運(yùn)用的洗板液一般為含0.05%Tween20的中性PBS，Tween20為一種非離子去垢劑，既含親水基團(tuán)，也含疏水基團(tuán)，其在洗刷中的作用機(jī)理是，憑仗其疏水基團(tuán)與經(jīng)疏水性彼此作用吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基團(tuán)構(gòu)成疏水鍵，然后削弱蛋白與固相的吸附，一同在其親水基團(tuán)與液相中水分子的結(jié)合作用下，促進(jìn)蛋白質(zhì)脫離固相而進(jìn)入液相，這樣就可抵達(dá)去掉非特異吸附物的目的，但由于抗體或抗原的包被一般也是通過在堿性條件下與固相的疏水性彼此作用而吸附于固相，因而要注意非離子去垢劑的運(yùn)用濃度，洗板液中Tween20濃度高于0.2%，可使包被于固相上的抗原或抗體解吸附而影響實(shí)驗(yàn)的測(cè)定下限。

在實(shí)驗(yàn)室中，ELISA試劑盒測(cè)定的洗板一般有兩種辦法，即手工和洗板機(jī)洗板。手工洗板就是在每次反應(yīng)溫育后，將反應(yīng)液吸出或甩干，然后在板孔中加滿洗液，放置2～3分鐘后，將洗液吸出或甩干，再在吸水紙上拍干。重復(fù)上述洗刷過程3～4次，終究在吸水紙上拍干，即可進(jìn)行下一步測(cè)定操作。洗板機(jī)洗板則是將上述手工操作改由洗板機(jī)進(jìn)行，運(yùn)用洗板機(jī)洗板的一個(gè)特點(diǎn)是，每次洗板后不能拍干，故有較多的液體殘留，液體殘留量小的洗板機(jī)洗板至*所需的次數(shù)要少于殘留量大的洗板機(jī)。在特定臨床實(shí)驗(yàn)室所運(yùn)用的洗板機(jī)，終究洗多少次能抵達(dá)要求，可進(jìn)行下面這個(gè)簡(jiǎn)略的實(shí)驗(yàn)：挑選4×8 HBsAgELISA包被板條，每2×8孔分別參與相同一份弱陽性和一份陰性樣本，按試劑盒說明參與酶結(jié)合物并結(jié)束溫育后，洗板孔時(shí)按*排4孔洗1次、第二批4孔洗2次、第3排4孔洗3次——直至第8排4孔洗8次，加底物顯色測(cè)定，如洗3次后，顯色不再改變，即洗3次的板孔比色測(cè)定與4次、5次洗板的板孔的吸光度等相同，陽性/陰性值堅(jiān)持zui大不變，則可以斷定該實(shí)驗(yàn)室所用洗板機(jī)3次洗板即可抵達(dá)要求。