當(dāng)經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液放入樣品管中,被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細(xì)胞被排成單列,以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體,充電后振動(dòng),使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)過(guò)帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí),在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,沒(méi)有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。 [1]
,從而對(duì)細(xì)胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的一種現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù),它可根據(jù)發(fā)射光的熒光強(qiáng)度和波長(zhǎng)將發(fā)光顆粒亞群分開(kāi)并可實(shí)現(xiàn)單克隆分選,能復(fù)雜樣本中的細(xì)胞進(jìn)行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時(shí)對(duì)其中一種到四種特定細(xì)胞進(jìn)行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細(xì)胞芯片制備。分選后的細(xì)胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細(xì)胞PCR擴(kuò)增或原位雜交等,可進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細(xì)胞之間的差異化研究。硬件中樣本細(xì)胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標(biāo)細(xì)胞的高回收率。 [2]
流式細(xì)胞分選儀
流式細(xì)胞分選儀
特點(diǎn)編輯
1. 少量細(xì)胞分選時(shí),流式細(xì)胞分選精確度高(99%以上),速度快。的流式細(xì)胞儀的分選速度可達(dá)25000個(gè)細(xì)胞/秒以上,比傳統(tǒng)的分選速度提高了很多倍,需要一天的工作只需要幾小時(shí)就能完成。不過(guò)流式細(xì)胞儀分離細(xì)胞的量還是有一定的限制,一次分離的大合理量約為10個(gè)細(xì)胞。如果細(xì)胞量超過(guò)10個(gè),則需要耗費(fèi)10小時(shí)以上,分選后細(xì)胞的活力會(huì)受到很大的影響.
2. 可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)Marker分選,正選負(fù)選同時(shí)進(jìn)行。以前的流式細(xì)胞儀只能給液滴充上正電荷或負(fù)電荷,因此在電場(chǎng)中只能向左或向右偏轉(zhuǎn),即兩路分選。儀器可以給液滴充以不同的電量,從而調(diào)整液滴的偏轉(zhuǎn)角度,實(shí)現(xiàn)多路分選。BD的FACSAria流式細(xì)胞儀就可以進(jìn)行四路分選。
3. 不僅僅限于表面抗原,流式細(xì)胞儀可以根據(jù)任何能檢測(cè)到的發(fā)光度(如細(xì)胞體積)或熒光(如DNA、RNA或蛋白含量,酶活性,特異抗原)散射度差異來(lái)分離細(xì)胞。如果能保證流式細(xì)胞儀的無(wú)菌狀態(tài),那么分選后的細(xì)胞還可以進(jìn)行培養(yǎng)或其他分析。
4. 如果只是偶爾做幾次細(xì)胞分選的話,用流式分選還是比較劃算的,只需要準(zhǔn)備樣品和抗體,交納一定的儀器使用費(fèi)即可,不需要購(gòu)買配套的設(shè)備。 [3]
應(yīng)用編輯
流式細(xì)胞分析/分選系統(tǒng)主要應(yīng)用于: [4] 1)干細(xì)胞組織工程在研究;2)細(xì)胞增值、活性和凋亡研究;3)疾病細(xì)胞如炎癥細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸研究;4)基因表達(dá)和表達(dá)調(diào)控研究;5)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)和生物大分子間相互作用研究;6)各種病原體如病毒、細(xì)菌等基礎(chǔ)和致病性和致病機(jī)理研究;7)藥理藥效和藥物開(kāi)發(fā)研究;8)移植和細(xì)胞治療研究;9)生物材料對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、活性和功能的影響等。利用儀器的分選功能分選得到高純度、高活性的稀有細(xì)胞,通過(guò)直接培養(yǎng)、誘導(dǎo)、增殖、分化、活化和移植等進(jìn)行更深一步的細(xì)胞功能和細(xì)胞治療探索,還可以在此基礎(chǔ)上逆向進(jìn)行基因組合蛋白質(zhì)組相關(guān)研究,尋找致病基因、致病蛋白和疾病信號(hào)傳導(dǎo)方式。
流式分選服務(wù) 實(shí)驗(yàn)耗材
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- 公司名稱上海宸功生物技術(shù)有限公司
- 品 牌
- 型 號(hào)
- 所 在 地上海
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間2023/9/11 9:39:31
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上海宸功生物科技有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司具有具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺(tái),成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì),可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性,同時(shí)又具有Z有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學(xué)試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門類上萬(wàn)種產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。