三、技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

1、高通量，低成本：一次測(cè)序可得到數(shù)百萬(wàn)條序列，單次運(yùn)行可經(jīng)濟(jì)分析多個(gè)樣品；

2、高分辨率：基于高通量測(cè)序技術(shù)能夠直接從單核苷酸水平研究小分子RNA，不存在傳統(tǒng)芯片雜交的熒光模擬信號(hào)帶來(lái)的交叉和背景噪音問(wèn)題，非常有利于區(qū)分相同家族以及序列極為相似的不同sRNA；

3、高精準(zhǔn)度：reads能覆蓋sRNA全序列，可成功檢測(cè)低豐度表達(dá)的miRNA；

4、通用平臺(tái)，不依賴已知信息：可進(jìn)行任何物種的sRNA序列測(cè)定，既能鑒定已知的miRNA，又能預(yù)測(cè)新的miRNA；

5、可重復(fù)性高：深度測(cè)序保證了抽樣隨機(jī)性，重復(fù)性非常好，無(wú)需重復(fù)實(shí)驗(yàn)

四、樣本要求：

1、樣品類(lèi)型：完整且無(wú)污染的總RNA；

2、樣品需求量（單次）：≥10 μg；

3、樣品濃度：≥200 ng/μL；

4、樣品純度：OD260/280 =1.8~2.2；OD260/230≥2.0；28S:18S≥1.5；RIN≥8.0；23S:16S≥1.5 （此項(xiàng)要求只針對(duì)原核生物）。

五、成功案例：

【案例一】：采用新一代測(cè)序技術(shù)分析浸水24小時(shí)后的玉米種子的小RNA文庫(kù)，進(jìn)一步分析確認(rèn)了115個(gè)已知miRNA屬于24個(gè)miRNA家族，并發(fā)現(xiàn)了167個(gè)新的玉米miRNA。使用同樣的方法，再次建立小RNA文庫(kù)，將獲得的已知miRNA和新發(fā)現(xiàn)miRNA的信息與重新構(gòu)建的小RNA文庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，成功推測(cè)出106個(gè)新miRNA的候選靶標(biāo)。研究結(jié)果顯示：玉米浸水種子中存在著miRNA媒介的基因表達(dá)調(diào)控。