DNA純化可以：（1）獲得高純度的DNA；（2）濃縮DNA；（3）用于測(cè)序、遺傳信息分析等分子生物學(xué)應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)步驟

一、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性 
 

1.  說(shuō)明書(shū)，耗材：96孔DNA制備板，96孔1.6 ml深孔板，96孔V型底板。
 

2.  Buffer PCR-A：DNA結(jié)合溶液。室溫密閉貯存。若出現(xiàn)沉淀，應(yīng)于65°C溫浴溶解并冷卻至室溫后再使用。
 

3.  Buffer W2 concentrate：去鹽液。使用前，根據(jù)瓶上的體積加入乙醇，混合均勻，室溫密閉貯存?？捎?乙醇或95%無(wú)水乙醇。
 

4.  Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5。室溫密閉貯存。
 

二、操作步驟 
 

用戶(hù)可以選擇負(fù)壓法或離心法。
 

A. 負(fù)壓法
 

1A.  正確連接負(fù)壓裝置，將96孔DNA制備板置于負(fù)壓裝置上；在PCR、酶切、酶標(biāo)或測(cè)序反應(yīng)液中，加3個(gè)體積的Buffer PCR-A（若Buffer PCR-A不足100 μl，加至100 μl）；混合均勻后轉(zhuǎn)移到96孔DNA制備板中，開(kāi)啟并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-25-30英寸汞柱，緩慢吸掉板中溶液。
 

2A.  加0.3 ml Buffer W2，吸盡管中溶液。以同樣的方法再用0.3 ml Buffer W2洗滌兩次。
 

* 確認(rèn)在Buffer W2 concentrate中已按試劑瓶上的體積加入無(wú)水乙醇。
 

3A.  保持負(fù)壓將96孔DNA制備板抽吸10 min。
 

4A.  導(dǎo)流管朝下將96孔DNA制備板于長(zhǎng)纖維性紙巾上用力拍擊6次。
 

.  將96孔DNA制備板置于96孔V型底板上，在膜正*加25-30 μl水或Eluent，室溫靜置1 min。≥3 000×g離心5 min洗脫DNA。
 

B. 離心法
 

1B.  在PCR、酶切、酶標(biāo)或測(cè)序反應(yīng)液中，加3個(gè)體積的Buffer PCR-A（若Buffer PCR-A不足100 μl，加至100 μl）；混勻后，轉(zhuǎn)移到96孔DNA制備板中，將96孔DNA制備板置于96孔1.6 ml深孔板中，1 000×g離心1 min，棄濾液。
 

2B.  在96孔DNA制備板中，加0.3 ml Buffer W2，1 000×g離心1 min，棄濾液。以同樣的方法再用0.3 ml Buffer W2洗滌一次。
 

* 確認(rèn)在Buffer W2 concentrate中已按試劑瓶上的體積加入無(wú)水乙醇。
 

3B.  將96孔DNA制備板置于96孔1.6ml深孔板中，≥3 000×g離心10 min。
 

4B.  將96孔DNA制備板置于潔凈的96孔V型底板中，在膜正*加25-30 μl水或Eluent，室溫靜置1 min。≥3 000×g離心5 min洗脫DNA。