A．輔助噬菌體感染和pⅧ誘導(dǎo)產(chǎn)生
1．按10:1感染重數(shù)加入VSC-M13輔助噬菌體[約1012空斑形成單位（pfu）]到100ml 已轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中（見實驗方案6．3）。于37℃靜置孵育30分鐘。
2．將上述培養(yǎng)物加入到一個含有500mlSOPamp/glu培養(yǎng)基的三角瓶中。加入0．6 m1*溶液和6ml 20％阿拉伯糖溶液。于37℃振搖培養(yǎng)過夜。
B．收集擴增后的噬菌粒庫
1．于4℃ 12000g轉(zhuǎn)速（對于JA-10轉(zhuǎn)子為8000r/min）將上述過夜培養(yǎng)物離心。將上清 轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中，并再次離心。
2．將上清轉(zhuǎn)移到另一個新的離心管中，加入0．2倍體積的PEG/NaCl以沉降噬菌體。充分混合后冰上靜置1小時。
3．于8000r/min離心15分鐘將噬菌體沉降。小心將上清除去，用10ml PBS將噬菌體沉淀重懸。滴定噬菌體儲液；滴定結(jié)果出來前，噬菌體懸液可在4℃短期保存24小時。若需要長期保存，可將噬菌體懸液以1000倍庫當(dāng)量，于-20℃分批凍存。

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