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ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀）

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ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀）ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀）操作說明手冊(cè)一、概述蛋白質(zhì)的測(cè)定方法

詳細(xì)介紹

ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀）ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀）操作說明手冊(cè)

一、概述蛋白質(zhì)的測(cè)定方法，目前仍以1883年凱達(dá)爾氏(Kiedahl)發(fā)明的定氮法為基礎(chǔ)，它根據(jù)各種蛋白質(zhì)都具有固定比數(shù)的氮這一事實(shí)，通過對(duì)氮的測(cè)定而推算出蛋白質(zhì)含量，此法所得的含氮量除了確定屬于蛋白質(zhì)組成成分的氮以外，還包括非蛋白質(zhì)組成的其他及無機(jī)態(tài)氮，所以換算所得的蛋白質(zhì)含量稱作為粗蛋白含量，一般蛋白質(zhì)中的含量為18%，換算后即每6.25克蛋白質(zhì)中含有1克氮，因此6.25成為換算系數(shù)K，但是不同的農(nóng)產(chǎn)品及其制品的實(shí)際含氮量有區(qū)別，所以不同農(nóng)產(chǎn)品必須采用不同的換算系數(shù)，如花生、大豆、蠶豆、大麥、小麥、燕麥、黑麥等含氮為17.6%，求得K=5.7，蕎麥、葵花籽、亞麻籽、籽、棉花籽、蓖麻籽等換算系數(shù)則為K=5.50，玉米、菜籽為6.00，水稻為5.95，上述以外的其他農(nóng)產(chǎn)品的換算系數(shù)均適用6.25。盡管如此，目前世界上還沒有直接分離測(cè)定含蛋白質(zhì)的可行方法。因此，迄今為止在國(guó)內(nèi)外凱氏定氮法仍然是測(cè)定蛋白質(zhì)含量的經(jīng)典方法。所得結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定。

我公司研制生產(chǎn)的ATN-100型定氮儀（蛋白質(zhì)測(cè)定儀），是引進(jìn)消化吸收國(guó)內(nèi)外檢測(cè)新技術(shù)，結(jié)合我國(guó)國(guó)情，應(yīng)用凱氏定氮法原理，采用化學(xué)與物理學(xué)相結(jié)合完成的成套蛋白質(zhì)含量快速測(cè)定裝置。為糧食、食品、飼料、農(nóng)業(yè)、商檢等檢測(cè)部門提供了理想的檢測(cè)設(shè)備。

二、工作原理

KDN-04B（08B）型定氮儀檢測(cè)原理為：

整套裝置，由電加熱消化器、蒸餾器兩部分組成。要提高蛋白質(zhì)含量測(cè)定的檢測(cè)速度，其關(guān)鍵是要加速樣品消化煮解的時(shí)間，KDN系列定氮儀消化裝置采用井式電加熱爐，增大了消化管受熱面，使消化管連同管內(nèi)所注入的10ml H2SO4及試樣置入消化管插入井式爐內(nèi)加熱取得更佳的熱效應(yīng)，在消化前置入硒片作為催化劑進(jìn)一步加速消化煮解，大大縮短消化時(shí)間。消化管內(nèi)溢出的SO2等有害氣體，通過消化管上的排污管經(jīng)抽吸泵由水帶入下水道，有效的抑制有害氣體的外逸，由省略了實(shí)驗(yàn)室中安裝毒氣通風(fēng)櫥，試樣經(jīng)40分鐘左右消化煮解，即可消化。

消化的過程主要反應(yīng)如下：

R•C•H•NH2•COOH + H2SO4 → CO2 + SO2 + NH3 + H2O

2NH3 + H2SO4 → (NH4)2SO4

蒸餾與吸收過程的主要反應(yīng)如下：

(NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2NH3 + 2H2O

NH3 + 4H3BO3 → NH4HB3O7 + 5H2O

然后經(jīng)滴定，計(jì)算蛋白質(zhì)含量，滴定的過程是鹽酸和硼酸氫銨反映的過程。

NH4HB3O7 + HCl + 5H2O → NH4Cl + 4 H3BO3

三、技術(shù)參數(shù)

1．測(cè)定品種：糧食、食品、飼料、釀造、土壤、制糖、乳制品、藥物等物質(zhì)

2．測(cè)定范圍：含氮量0.05%~90% ( 0.1~200mg)

3．測(cè)定數(shù)量：消化：一次同時(shí)消化個(gè)數(shù)按爐孔數(shù)定；單個(gè)蒸餾

4．測(cè)定時(shí)間：消化每批45min；蒸餾每個(gè)6min

5．測(cè)定重現(xiàn)性：平行試驗(yàn)結(jié)果符合GB/T 6432-94

6．電源：220V，50Hz

四、使用說明

1．其他儀器和用具

1．1分析天平：感量0.0001g

1．2實(shí)驗(yàn)室用粉碎機(jī)或研缽

1．3酸式滴定管：25ml或10ml

1．4錐形瓶：容積250ml

1．5分樣篩：孔徑0.45mm(40目)

2．試劑

2．1鹽酸(HCl)：分析純(GB622) 0.05mol/L標(biāo)準(zhǔn)液，(4.2ml鹽酸，注入1000ml蒸餾水)碳酸鈉法標(biāo)定鹽酸。

2．2氫氧化鈉(NaOH)：化學(xué)純或工業(yè)純(GB629)、40g溶于蒸餾水中溶成100ml，配成40%水溶液(m/v)。

2．3硼酸(H3BO3)：分析純(GB628)2g，溶于蒸餾水中配成100ml2%水溶液(m/v).

2．4混合指示劑：甲基紅(G5H15N3O2)(HG3-958)溶于乙醇配成0.1%乙醇溶液，溴甲酚綠(HG3-1220)溶于乙醇配成0.5%乙醇溶液，二種溶液等體積混合，陰涼處保存(保存期三個(gè)月以內(nèi))。

2．5硫酸銅(CuSO4•5H2O)分析純(GB655)10g；硫酸鉀(K2SO4) (HG3-920)分析純150g，在研缽中研磨，仔細(xì)混勻后過40目篩(加速劑)。

2．6濃硫酸(H2SO4)化學(xué)純(GB625)(含量98%、無氮)。

3．操作規(guī)程

3．1樣品消化

稱取經(jīng)粉碎通過40-60目/寸試樣0.5-1g(視含量而定)無損的置入已洗滌烘干的試管中加催化劑5g左右和10ml左右硫酸。

將消化管分別放入消化架各個(gè)孔內(nèi)，然后置于消化爐上，開啟抽氣三通上連接的自來水，使抽氣三通處于吸氣狀態(tài)。接通電源，在加熱初始階段需注意觀測(cè)，防止試樣因急沸而飛濺。(初化時(shí)，選用電壓型控溫消化爐起初控制在150V左右，15分鐘左右后可滿電壓工作；選用數(shù)顯型消化爐起初控制在200度左右，20分鐘左右后再設(shè)定所需溫度。)

消化結(jié)束后（消化液呈澄清透明狀），將消化管架移至冷卻架冷卻至40-50度左右。然后進(jìn)行下一步的蒸餾。

3．2蒸餾

ATN-100型定氮儀蒸餾器，堿液及蒸餾水采用內(nèi)置的電磁泵加入，NaOH、H2O注入接口用橡膠管套入后分別置入裝有NaOH、H2O的容器（自備）內(nèi)，加液時(shí)按面板上相應(yīng)開關(guān)，液體經(jīng)電磁泵自動(dòng)流入消化管內(nèi)，加入毫升數(shù)視標(biāo)尺所注位置而定（一般堿液加入量是硫酸用量的5倍）。

1．打開電源，打開自來水，接冷卻水的不必開得過大，出水口有水流出即可，用排水管上的夾子夾緊排水管。打開面板上蒸汽開關(guān)，蒸餾水即自動(dòng)進(jìn)入蒸汽爐內(nèi)，達(dá)到一定液位后自動(dòng)停止進(jìn)水，進(jìn)入加熱狀態(tài)，待蒸汽管噴出蒸汽后關(guān)閉蒸汽開關(guān)。

2．在250ml三角接收瓶中加入50ml 2%H3BO3和2-3滴混合指示劑，并使接收瓶托盤往上移動(dòng)，使滴管浸入液面下。

3．向上扳動(dòng)蒸餾器側(cè)面紅色手柄把消化管固定在左邊的托架上，打開面板上H2O開關(guān)，向消化管內(nèi)注入蒸餾水；再打開NaOH開關(guān)，向消化管內(nèi)注入氫氧化鈉溶液，然后開啟蒸氣開關(guān)，向試管內(nèi)注入蒸汽，進(jìn)行蒸餾，在接收瓶?jī)?nèi)接收液達(dá)150ml左右時(shí)移下接收瓶，用蒸餾水沖洗滴管口繼續(xù)蒸餾半分鐘，然后關(guān)閉蒸氣開關(guān)等消化管內(nèi)停止冒泡時(shí)，取下接收瓶，待滴定用。

4．更換消化管，進(jìn)行下一個(gè)樣品的蒸餾。（執(zhí)行第2和第3步）

5．關(guān)機(jī)，所有的樣品蒸餾結(jié)束后關(guān)閉電源、水；打開排水夾子，蒸汽開關(guān)和進(jìn)水開關(guān)都打開，擦干凈機(jī)器。

3．3滴定

用標(biāo)定后的鹽酸溶液進(jìn)行滴定接收瓶?jī)?nèi)的溶液，滴定溶液由綠色變?yōu)榈仙珵榻K點(diǎn)，記下消耗鹽酸溶液的毫升數(shù)，按下式計(jì)算蛋白含量：

蛋白含量(%)=

式中：V2—滴定試樣時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 (ml)

V1—滴定空白時(shí)消耗酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 (ml)

C—標(biāo)準(zhǔn)酸溶液的摩爾濃度

0.014—氮的毫克當(dāng)量數(shù)

K—氮換算成粗蛋白質(zhì)的系數(shù)

W—試樣重量 (g)

(空白測(cè)定：用0.1克糖代替樣品或不加樣品做空白測(cè)定)

平行測(cè)定的結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留小數(shù)后二位。

3．4 換算系數(shù)

結(jié)果報(bào)告中必須注明氮換算成粗蛋白質(zhì)的系數(shù)，換算系數(shù)見下表。

樣品名稱換算系數(shù) 數(shù)據(jù)來源

小麥 5.70 GB2905

大麥 5.70 GB2905

釀酒大麥 6.25 TOCT10846

面粉 5.70 GB5009.5

面包 5.70 AOAC14.103

大豆 6.25 GB2905

5.71 GB5009.5

玉米 6.25 食品常用數(shù)據(jù)手冊(cè)

6.24 GB5009.5

飼料 6.25 GB6432

肉制品 6.25 GB5009.5

乳制品 6.38 GB5009.5

牛奶 6.38 ACAC16.036

芝麻 5.30 GB5009.5

油菜 5.53 油菜籽綜合利用

3．5注意事項(xiàng)

1．消化時(shí)若有氣體外溢，加大抽氣三通連接的自來頭的壓力。消化密封圈每次試驗(yàn)結(jié)束后清洗一遍延長(zhǎng)使用壽命。

2．每天工作完，把NaOH溶液外接的皮管移入蒸餾水瓶?jī)?nèi)，前面套好消化管抽洗幾次，防止堿液殘留在堿泵內(nèi)而影響使用壽命，也可防止單向閥粘連，待下次使用時(shí)，在蒸餾樣品前需先排出100mlNaOH，以防稀釋NaOH，造成個(gè)樣品加入的堿液濃度不夠。

3．每次試樣蒸餾結(jié)束，必須迅速取下消化管，防止消化管液體倒吸至蒸發(fā)爐內(nèi)腐蝕電熱管。

4．用戶在遵守本儀器的運(yùn)輸、貯存、安裝、調(diào)整和使用規(guī)程的條件下，如發(fā)現(xiàn)儀器因制造質(zhì)量問題而不能正常工作時(shí)，從收獲之日起一年內(nèi)實(shí)行三包；或開箱時(shí)發(fā)現(xiàn)包裝不良而發(fā)生損壞，附件與裝箱單不符，短缺零件等情況，請(qǐng)與我公司質(zhì)檢部門聯(lián)系。來函注明產(chǎn)品型號(hào)、編號(hào)和出廠日期。本儀器使用時(shí)，要求用戶嚴(yán)格按照說明誰規(guī)定進(jìn)行，如有疑問或?qū)Y(jié)構(gòu)改進(jìn)的意見，請(qǐng)來函告知我公司質(zhì)檢部門。

關(guān)鍵詞：定氮儀蛋白質(zhì)測(cè)定儀檢測(cè)設(shè)備蒸餾器催化劑

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