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羊弓形體(tox)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

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更新時間:2016-06-12 02:18:44瀏覽次數(shù):972次

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羊弓形體(tox)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書
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羊弓形體(tox)酶聯(lián)免疫分析(ELISA

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

藥品名稱:

通用名:羊弓形體(tox)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

使用目的:

本試劑盒用于定性測定羊血清,血漿及相關液體樣本中弓形體(tox)。

實驗原理

本試劑盒采用間接法測定標本中弓形體(tox)。用純化的羊弓形體(tox)抗體包被微孔板,制成固相抗體,與樣品中弓形體(tox)溫育后,加入*標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中弓形體(tox)的存在與否。,

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

陰性對照

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

陽性對照

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

*標記的抗-IgG抗體

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

鏈霉親和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

 

 

標本要求

1不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

操作步驟

1.         編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照(不加樣品、*標記的抗-IgG抗體、鏈霉親和素-HRP1

2.         加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,37℃溫育45分鐘。

3.         配液:3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。

4.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復4次,拍干。

5.         加*標記的抗-IgG抗體:每孔加入*標記的抗-IgG抗體50μl(空白孔除外)。37℃溫育30分鐘

6.         洗滌:操作同4。

7.         加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP(空白孔除外),輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

8.         洗滌:操作同4

9.         顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

 

結果判定:

  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定:樣品OD< 臨界值(CUT OFF)者為羊弓形體(tox)陰性

  陽性判定:樣品OD臨界值(CUT OFF)者為羊弓形體(tox)陽性

 

注意事項

1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

 

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個月

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羊弓形體(tox)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

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