AOAC和FDA**學(xué)分析手冊(BAM)規(guī)定大腸菌群為革蘭氏陰性桿菌,能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸和產(chǎn)氣,大腸菌群菌落在3M PetrifilmTM快速大腸菌群測試片上生長產(chǎn)酸,PH指示劑使培養(yǎng)基顏色從桔紅色到黃色,推測有大腸菌群,在大腸菌群菌落周圍有氣泡的可證實(shí)為大腸菌群。
ISO使根據(jù)菌落由特定方法在選擇性培養(yǎng)基上的生長特性來定義大腸菌群的。
ISO方法4832,根據(jù)菌落直接計(jì)數(shù)的方法,通過大腸菌群在帶有乳糖的VRB(Violet Red Bile)瓊脂培養(yǎng)基上的菌落大小及產(chǎn)酸能力來定義。在 PetrifilmTM快速大腸菌群測試片上這些具有產(chǎn)酸能力的大腸菌群能通過黃色酸環(huán)或紅色菌落帶(或環(huán)帶)氣泡被指示出來。
ISO方法4831,則是用MPN的方法來計(jì)數(shù)大腸菌群,通過它們在含有乳糖的選擇性肉湯培養(yǎng)基上生長并產(chǎn)氣的特性來定義。在PetrifilmTM快速大腸菌群測試片上大腸菌群顯示為紅色帶氣泡的菌落。AFNOR則是在與ISO方法4831和ISO方法4832相比較的基礎(chǔ)上認(rèn)證PetrifilmTM快速大腸菌群測試片法的。
圖1:
黃色的酸環(huán)帶可能在培養(yǎng)6小時(shí)后即開始出現(xiàn)。如果存在大腸菌群,黃色的環(huán)帶就會(huì)在培養(yǎng)期間出現(xiàn)并擴(kuò)散開。
按AOAC/BAM方法判讀
1、計(jì)數(shù)黃色酸環(huán)數(shù)帶或不帶有紅色中心,推測為大腸菌群。
按ISO4832(VRBL)方法判讀
2、以14小時(shí)培養(yǎng)計(jì)數(shù)作*后結(jié)果(AFNOR認(rèn)可)
圖2:14小時(shí)培養(yǎng)
8-24小時(shí)培養(yǎng)大腸菌群菌落計(jì)數(shù)
紅色帶或不帶氣泡的菌落可能在8小時(shí)開始出現(xiàn),通過培養(yǎng)將繼續(xù)生長。
按AOAC/BAM方法判讀
1、計(jì)算紅色帶有氣泡的菌落,當(dāng)一出現(xiàn)就可確認(rèn)為大腸菌群。
按ISO4831(MPN)方法判讀
1、紅色有氣泡的菌落,計(jì)數(shù)為大腸菌群。
2、以24±2小時(shí)培養(yǎng)計(jì)數(shù)作*后結(jié)果(AFNOR認(rèn)可),但加工的豬肉除外。
按ISO4832(VRBL)方法判讀
2、以24±2小時(shí)培養(yǎng)計(jì)數(shù)作*后結(jié)果(AFNOR認(rèn)可)。
型號:6412 規(guī)格:25片/包 20包/箱
優(yōu)勢:a、6-14小時(shí)培養(yǎng)可估計(jì)大腸菌群數(shù)(黃色斑點(diǎn))
b、24小時(shí)計(jì)數(shù)所有帶氣泡的紅點(diǎn)為確認(rèn)大腸菌群數(shù)
培養(yǎng)時(shí)間和溫度因方法而定,*通用的認(rèn)可方法是: AOAC方法2000.15 35℃±1℃培養(yǎng)24±2h AFNOR認(rèn)可方法3M 01/5-03/97A,B (與ISO4832VRBL方法等效) AFNOR認(rèn)可方法3M 01/5-03/97C (與ISO4831MPN方法等效) 30℃±1℃培養(yǎng)24±2h |