樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備G6P工作溶液（50 µL）
2.添加G6P標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50 µL）
3.在室溫下孵育30分鐘-2小時(shí)
4.監(jiān)測(cè)Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的熒光增加

溶液制備 

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 NADP儲(chǔ)備溶液（100X）：
在NADP小瓶（組分C）中加入100 µL H2O，制成100X NADP儲(chǔ)備溶液。

1.2 G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 mM）：
將100 µL H2O或1x PBS緩沖液加到G6P標(biāo)準(zhǔn)品（組分D）的小瓶中，制成100 mM G6P標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

G6P標(biāo)準(zhǔn)
將10 µL 100 mM G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液加到990 µL 1x PBS緩沖液中，生成1 mM G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液。 然后，將100 µL 1 mM G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到900 µL 1 x PBS緩沖液中，制成100 µM G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液（G6P7）。 取100 µM G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液（G6P7）并進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，以使用1x PBS緩沖液連續(xù)稀釋G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液（G6P6- G6P1）。注意：稀釋的G6P標(biāo)準(zhǔn)溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4小時(shí)內(nèi)使用。

3.工作溶液

3.1將5 mL測(cè)定緩沖液（組分B）加入一瓶酶探針（組分A）中，并充分混合。

3.2將50 µL 100X NADP儲(chǔ)備溶液添加到組分A + B的瓶子中，并充分混合以制成G6P工作溶液。 注意：此G6P工作溶液足以用于一個(gè)96孔板。