腎上腺素試劑盒(MN) ELISA試劑盒

上海研吉生物有限公司代理幾千種 ELISA 試劑盒,數(shù)萬(wàn)種抗體,并代理產(chǎn)品近萬(wàn)種,涉及分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、部分國(guó)產(chǎn)化學(xué)試劑和實(shí)驗(yàn)儀器等生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域.為了節(jié)省您的時(shí)間,我們還可以提供代檢測(cè)服務(wù).

ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:

1.　正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性.有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉.

2.　在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:

(1)　固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等.其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等.目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板.不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀(guān)察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好.

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間.吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí).蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值.選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度.對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml.

(3)　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份).然后再固定其它條件或采取"方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度.腎上腺素試劑盒(MN) ELISA試劑盒

(4)　酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色.有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù).有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體.底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng).通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜.底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入

具體事項(xiàng)請(qǐng).