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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

CM-H036人小腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL氫氯噻嗪質(zhì)量規(guī)格：度>99%,ARHydrochlorothiazide

HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫氯噻嗪（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Hydrochlorothiazide

小鼠肝外膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL醋酸高(>95%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BCLead (IV) acetate

ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](穩(wěn)定株)小鼠軟骨細胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1：1)+10% FBS粉(>99%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCLead powder

IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / ierleukin 7 蛋白堿式碳酸(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRLead(II) carbonate basic
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元十一酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,>99.5%(GC)Undecanoic acid

RPS6KA6 Others Human 人 RSK4 / RPS6KA6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)Adipic acid

人成纖維細胞;HFF氯化鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR chloride

SPA-A1細胞，肺腺癌細胞 人非小細胞肺腺癌細胞,NCI-H1975細胞 CL-0452T/G HA-VSMC(人血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸胍質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學級Guanidine

中國倉鼠卵巢細胞;CHO側金盞花醇,阿東糖醇,核糖醇質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) ,進口Adonitol
大鼠腹部脊髓神經(jīng)元(RVSCI)(1×106)SC-514;IKK-2抑制劑質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSC514

草魚腎細胞;GIKγ-環(huán)糊精 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRγ-Cyclodextrin

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755 小鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL倍他環(huán)糊精,2,6-二-β-環(huán)糊精質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMe-β-CD

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse埃博霉素B；帕土匹龍質(zhì)量規(guī)格：>98%,BREpothilone B(EPO906, Patupilone)

EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 人細胞裂解液 (陽性對照) A 83-01;A83-01質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRA8301
植物硝態(tài)氮測試盒人臍動脈內(nèi)皮細胞裂解物HUAECL黃體生成激素釋放激素（4-10）LHRH (4-10)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細胞裂解液 (陽性對照) 細胞激活五肽Lymphocyte Activating Pentapeptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人腦動脈血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL蜂Melittin(Mellitin)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

COS-1細胞，非洲綠猴腎細胞 T-24(膀胱變移細胞癌) 中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGFMetamorphosin AMetamorphosin A質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)新京都肽Neo-Kyotorphin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

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