產(chǎn)品品牌：ZCIBIO（茁彩生物）

產(chǎn)品名稱：人T-細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子（ICOS）ELISA 試劑盒

英文名稱：Human ICOS ELISA kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

實(shí)驗(yàn)樣本：血清、血漿、組織、細(xì)胞上清或其他生物樣本

應(yīng)用領(lǐng)域：人T-細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子（ICOS）ELISA 試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，不得用于臨床診斷

我的標(biāo)準(zhǔn)曲線是平的或者是非線性的，這可能是由于什么原因引起的？
引起不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線的原因有很多，常見(jiàn)的原因例舉如下：
◆ 確定稀釋是否得當(dāng)。
◆ 確定波長(zhǎng)是否正確。
◆ 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品必需在15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。（除非試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)特別說(shuō)明）
◆ 檢查背景是否過(guò)高。
◆ 確定酶標(biāo)板是否正確洗滌。 不恰當(dāng)?shù)南礈炜赡軙?huì)引起具有高背景的平直曲線。
◆ 在測(cè)定過(guò)程中重復(fù)讀板。在超過(guò)建議時(shí)間后讀板會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
◆ 如果高的標(biāo)準(zhǔn)品的讀數(shù)超過(guò)了酶標(biāo)儀的范圍，確定標(biāo)準(zhǔn)品是否正確溶解，孵育時(shí)間和溫度是否準(zhǔn)確。
◆ 為保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性請(qǐng)重復(fù)測(cè)定。
◆ 如果使用對(duì)照，對(duì)照的濃度必須在測(cè)定范圍內(nèi)。
◆ 在檢測(cè)和孵育過(guò)程中確定試劑沒(méi)有被污染。
◆ 沒(méi)有任何信號(hào)的平直標(biāo)準(zhǔn)曲線可能是由于酶結(jié)合物或者底物沒(méi)有反應(yīng)。 檢查各個(gè)操作過(guò)程
◆ 由于許多酶標(biāo)儀的限制，因此建議標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)由高向低做復(fù)孔。

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的s物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。  

1. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于2-8℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1 個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，或-80℃(3-6個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，避免反復(fù)凍融。

2. 試劑盒檢測(cè)范圍不等同于樣本的濃度范圍，如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品高值，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議查閱文獻(xiàn)后先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù))。

3. 若所檢樣本不在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議做預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其檢測(cè)有效性。

4. 若使用化學(xué)裂解液制備組織勻漿或細(xì)胞提取液,由于引入某些化學(xué)物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致ELISA測(cè)值出現(xiàn)偏差。

5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在不被檢出情況。

6. 某些重組蛋白可能與試劑盒中捕獲或檢測(cè)抗體不匹配而出現(xiàn)不被檢出的情況.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

從今日起，凡購(gòu)買上海茁彩生物品牌的Elisa試劑盒，均可提供免費(fèi)待測(cè)服務(wù)，為您提供專業(yè)的指導(dǎo)，在Elisa實(shí)際操作過(guò)程中，如遇到任何問(wèn)題均可咨詢。