傅經(jīng)理
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免疫熒光/IF - FJB染色價格:55元
免疫熒光/IF - FJB染色染色機(jī)制
FJB染色的原理是FJB染液是一種帶熒光的物質(zhì)，可以與變性的神經(jīng)元結(jié)合從而發(fā)綠色熒光，而正常神經(jīng)元不會與FJB染液結(jié)合所以不發(fā)熒光。
應(yīng)用
FJB可以與變性神經(jīng)元結(jié)合發(fā)出綠色熒光，從而可以標(biāo)記神經(jīng)組織內(nèi)的變性壞死神經(jīng)元?？梢越璐搜芯坎煌幚矸椒▽ι窠?jīng)組織的損傷。
染液配制
純水配成5mg/ml的濃縮液，用時0.1%的冰醋酸做溶劑，1:50-1:100稀釋
染色方法
1、石蠟切片脫蠟至水。
2、用現(xiàn)配的0.1%冰醋酸做溶劑，按1:50-1:100配制FJB的工作液，混勻，滴加到組織上室溫孵育20min;
3、純水沖洗，DAPI染核，再用PBS沖洗;
4、吹風(fēng)機(jī)吹干，二甲苯透明2min，加一滴中性樹脂封片，晾干。
染色結(jié)果
壞死神經(jīng)元胞漿和胞核呈綠色熒光，正常神經(jīng)元無著色。神經(jīng)元著色有時候伴隨著腦梗，在梗死附近著色較明顯。
注意事項(xiàng)
1、FJB染色中用到的0.1%的冰醋酸要現(xiàn)配現(xiàn)用。
2、所有染色步驟完成后，切片要自然晾干或用吹風(fēng)機(jī)低檔吹干，然后透明，樹膠封片，因?yàn)橐呀Y(jié)合的FJB可溶于甘油，酒精，所以不能直接用熒光封片劑封片，也不能在酒精中做脫水處理。
3、FJB與組織的結(jié)合可逆，因此做完后要盡快鏡檢拍照，避免熒光淬滅。
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