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動(dòng)物實(shí)驗(yàn) - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)

一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn) - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)項(xiàng)目介紹
　　蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics）一詞，源于蛋白質(zhì)（Protein）與基因組學(xué)（Genomics）兩個(gè)詞的組合，是大規(guī)模、高通量地研究一個(gè)細(xì)胞、組織或物種中表達(dá)的全套蛋白質(zhì)的學(xué)科?；诮陙?lái)質(zhì)譜技術(shù)的普及和發(fā)展，蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的重要部分。蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以對(duì)生物樣本中蛋白質(zhì)進(jìn)行大規(guī)模鑒定和定量，進(jìn)而從高通量數(shù)據(jù)中挖掘有用信息，為研究提供線索和方向。
　　目前蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域zuichengshu的即為niaoqiang法（shotgun），即從樣品中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)過(guò)還原、烷基化、酶解等步驟變?yōu)殡亩位旌衔?，再?jīng)過(guò)電噴霧進(jìn)入質(zhì)譜中掃描，得到質(zhì)譜圖，通過(guò)軟件和數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行解析，得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)信息。
主要設(shè)備：質(zhì)譜儀 Thermo Q Exactive / AB Secix 5600+

二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn) - 蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)應(yīng)用
　　蛋白質(zhì)組學(xué)是在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，如表達(dá)水平，蛋白間互作，翻譯后修飾，從而發(fā)現(xiàn)不同發(fā)育、生長(zhǎng)期和不同生理、病理?xiàng)l件下的特點(diǎn)，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和疾病機(jī)理研究中有著重要作用。

三、樣品保存運(yùn)輸
　　1、膠點(diǎn)/膠條樣本
　?、俚鞍琢看笥?00ng，4℃保存，冰袋運(yùn)輸。
　?、谑占瘯r(shí)，用雙蒸水對(duì)膠塊進(jìn)行清洗，采用干凈刀片將目的條帶區(qū)域（避免帶入空白或非目的區(qū)域）切下，裝入EP管中保存。
　?、劭既灸z條，需要條帶肉眼清晰可見(jiàn)，銀染膠條不建議進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定（銀染需質(zhì)譜兼容試劑盒銀染）。
　?、懿煌瑮l帶不建議混合處理，避免干擾。
　　⑤提供樣本時(shí)需提供膠塊考染圖和樣品取點(diǎn)圖。
　　2、蛋白溶液樣本
　?、俚鞍踪|(zhì)鑒定所需蛋白量至少大于10ug，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、诙康鞍踪|(zhì)組學(xué)所需蛋白量大于100ug，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、坌揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)所欲蛋白量大于5mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、芙ㄗh測(cè)定蛋白濃度后，液氮速凍，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度，方便實(shí)驗(yàn)室收到后進(jìn)行后續(xù)處理。
　?、輼颖救魹镮P實(shí)驗(yàn)后磁珠-抗體-蛋白復(fù)合物，注意不要加入loading buffer，應(yīng)采用wash buffer清洗后，離心去掉上清，重復(fù)三次，再使用PBS沖洗磁珠三次，去上清，收集磁珠沉淀。
　　3、細(xì)胞樣本
　?、偌?xì)胞量1x107個(gè)，收集細(xì)胞沉淀，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　　②收集時(shí)，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。
　　4、血清樣本
　　①樣本量500uL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。
　　5、血漿樣本
　?、贅颖玖?00uL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。
　　6、尿液樣本
　?、贅颖玖?mL，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、跇悠窇?yīng)盡量避免帶入糞便殘?jiān)?/span>
　 7、動(dòng)物組織樣本
　?、贅颖玖?00mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融?！　?/span>
　?、谑占瘯r(shí)，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時(shí)結(jié)冰。
　　③固定液浸泡過(guò)的樣本無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)。
　　8、植物組織樣本
　　①樣本量500mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、谑占瘯r(shí)，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時(shí)結(jié)冰?！?/span>
　?、酃潭ㄒ航葸^(guò)的樣本無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)。
　　9、微生物樣本
　?、贅颖玖扛芍?00mg，-80℃保存，純干冰運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
　?、谑占瘯r(shí)，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。