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所 在 地上海市
更新時間:2020-05-24 11:16:06瀏覽次數(shù):481次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線名稱 DT40細胞(雞淋巴瘤細胞)
別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
種屬 雞
年齡(性別) 1日齡
組織來源 法氏囊,淋巴瘤
生長特性 懸浮細胞
細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣
背景描述 DT40細胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導建株的細胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到,法氏囊中生成的腫瘤制成細胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后,建立了DT40細胞。DT40細胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游,表達的c-myc RNA水平較高。DT40細胞缺少一個正常c-myc基因,但含有兩個拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點,DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40細胞中都能誘導組織相容性(MHC)Ⅱ類抗原表達。v-rel誘導的MHCⅡ表達比c-rel誘導快,且其有效性在數(shù)周后達到c-rel的50倍。DT40細胞呈淋巴母細胞表型;傳染性檢測表明,DT40細胞釋放低水平的傳染性RAV-1,DT40細胞株可以用于穩(wěn)轉(zhuǎn)研究。
DT40細胞(雞淋巴瘤細胞)生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+0.05mM β-mercaptoethanol(PB180633)+10% Tryptose Phosphate Broth+5% Chicken Serum+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~48 hours
凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-2111 DSMZ; ACC-636
細流式檢測細胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對數(shù)坐標軸模式備用;
2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細胞群;
3) 在雙陰細胞門中,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCS和SSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細胞碎片,劃出碎片門,應用于所有細胞;
4) 在所有細胞中,反選碎片門,得到所有細胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,參照未經(jīng)藥物處理的對照組,劃出十字門,確定不同群細胞的比例。
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