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多元素火焰光度計(jì)

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更新時(shí)間:2020-04-29 16:52:55瀏覽次數(shù):566

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詳細(xì)介紹

多元素火焰光度計(jì)這是由于:a 熒光分析儀器在與激發(fā)光相垂直的方向測(cè)量熒光,與分光光度在一直線上測(cè)量相比,消除了透射光的影響,測(cè)量更為準(zhǔn)確,靈敏度高;b 吸光光度法只采用一個(gè)單色器,而熒光分析儀器有兩個(gè)單色器,分別用于獲得單色性較好的激發(fā)光和分出某一波長(zhǎng)的熒光,消除其它雜散光的干擾,其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也更高;c 熒光測(cè)量中的激發(fā)光源比吸收光度法的光源有更大的發(fā)射強(qiáng)度,光源更穩(wěn)定,因此其儀器的準(zhǔn)確度、靈敏度也就更高,綜上所述,熒光分光光度計(jì)熒光法的檢出限優(yōu)于吸光光度法。

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 物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng),以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測(cè)定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見(jiàn)光區(qū),除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒(méi)有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過(guò)處理使其顯色后再測(cè)定,故又稱(chēng)比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。

 核酸的定量是分光光度計(jì)使用頻率高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類(lèi)型的核酸,事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如:1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。

  測(cè)試后的吸光值經(jīng)過(guò)上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測(cè)試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而,實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者頭痛的問(wèn)題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。

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