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貨號(hào)	XG-X3412	生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

商品信息：

名稱產(chǎn)品	LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞	產(chǎn)品別稱	LS-513; LS 513
種屬	人	生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
換液頻率	2-3次/周	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
貨號(hào)	XG-X3412	組織來(lái)源	盲腸

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:5

背景描述 LS513 is a colorectal carcinoma cell line isolated in 1985 from a primary tumor biopsy from a 63 year old Caucasian male patient diagnosed with a Dukes' C mucin secreting cecal tumor located at the Bauhin valve.

年齡（性別）男；63歲

組織來(lái)源盲腸

細(xì)胞類型腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型結(jié)直腸癌細(xì)胞

生物安全等級(jí) 1

倍增時(shí)間 20 hours (PubMed=25984343)

致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice

抗原表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA); ICAM-1; HLA class I positive

基因表達(dá)情況 transforming growth factor beta 1

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2134

LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠腸平滑肌細(xì)胞	人可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒ELISA
小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞	禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
兔腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞	大鼠白介su2受體(IL-2R) 試劑盒 ELISA
小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞	蛇形隱孢子蟲PCR試劑盒
兔肝外膽管上皮細(xì)胞	羊痘病毒PCR試劑盒
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞	博爾納病病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠肺微血管周細(xì)胞	巴馬森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞	北沙參探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
大鼠原代內(nèi)皮祖細(xì)胞	豬多殺性巴氏桿菌PCR試劑盒
兔主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞	豬流行性腹瀉病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人附睪管上皮細(xì)胞	斑點(diǎn)氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠原代輸卵管上皮細(xì)胞	斑石鯛虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒
兔支氣管上皮細(xì)胞	豬鏈球菌細(xì)胞外蛋白因子（EPF）毒su基因PCR檢測(cè)試劑盒
人角質(zhì)形成細(xì)胞	LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞牛紐布病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠原代頸動(dòng)脈成纖維細(xì)胞	異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0ELISA試劑盒

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。