 |
伊萊博生物科技（上海）有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè),大中小型動(dòng)物實(shí)驗(yàn),細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù) |
會(huì)員.png)
聯(lián)系電話
15221734409
公司信息
- 聯(lián)系人：
- 張經(jīng)理
- 電話：
- 021-66010608
- 手機(jī)：
- 15221734409
- 傳真：
- 地址：
- 上海市寶山區(qū)長(zhǎng)江南路180號(hào)B區(qū)B650
- 郵編：
- 200439
- 個(gè)性化：
- www.yilaibohb.com
- 網(wǎng)址：
- www.shyilaibo.com/
| 參考價(jià) | ￥ 4500 |
| 訂貨量 | 1件 |
- 型號(hào)
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 其他
- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2024-09-26 10:14:46瀏覽次數(shù)：750
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!
質(zhì)粒載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)
一、質(zhì)粒載體的選擇
質(zhì)粒是細(xì)菌或細(xì)胞染色質(zhì)以外的自主復(fù)制遺傳成分，因其具有較小的分子量、易于操作且能在細(xì)菌中穩(wěn)定復(fù)制等特點(diǎn)，成為基因工程中常用的載體。在選擇質(zhì)粒載體時(shí)，需要考慮其復(fù)制能力、穩(wěn)定性、抗性基因、拷貝數(shù)以及是否含有適合外源基因插入的位點(diǎn)等因素。
二、目的片段的獲取
目的片段是需要被插入到質(zhì)粒載體中的外源DNA片段，可以通過多種方法獲取，如PCR擴(kuò)增、化學(xué)合成、基因克隆等。在獲取目的片段時(shí)，需要確保其序列的準(zhǔn)確性、完整性和純度。
三、質(zhì)粒載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)過程
?引物設(shè)計(jì)?：根據(jù)目的片段的序列信息，設(shè)計(jì)合適的引物，并在引物兩端加入與質(zhì)粒載體相匹配的酶切位點(diǎn)序列。
?PCR擴(kuò)增?：使用設(shè)計(jì)好的引物對(duì)目的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到足夠量的DNA片段。
?雙酶切?：分別使用限制性內(nèi)切酶對(duì)目的片段和質(zhì)粒載體進(jìn)行雙酶切處理，產(chǎn)生相同的粘性末端或平末端。
?連接?：使用DNA連接酶將酶切后的目的片段與質(zhì)粒載體進(jìn)行連接，形成重組質(zhì)粒。
?轉(zhuǎn)化?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)胞中，通過培養(yǎng)使重組質(zhì)粒在細(xì)胞中復(fù)制擴(kuò)增。
?篩選與鑒定?：通過抗性篩選、菌落PCR、質(zhì)粒提取及測(cè)序等方法，篩選出含有正確插入目的片段的重組質(zhì)粒，并進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定和驗(yàn)證。
