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猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒使用相關(guān)問(wèn)題解析

時(shí)間:2021/12/15閱讀:848
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  猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。將樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體依次加入被捕獲抗體包被的包被微孔中,孵育并*洗滌。與底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下變成藍(lán)色,在酸的作用下變成最終的黃色。顏色深度與樣本中的顏色深度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(OD值)并計(jì)算樣品濃度。

 

猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

 

  猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒樣品處理和要求:
  1、血清:全血標(biāo)本室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,1000g離心20分鐘,取上清液檢測(cè),或標(biāo)本保存于-20℃或-80℃℃,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  2.血漿:EDTA或肝素可用作抗凝劑。樣品采集后30分鐘內(nèi),2-8℃1000g離心20分鐘,或保存于-20℃或-80℃,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  3、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或其他生物樣品:1000g離心20分鐘,取上清液檢測(cè),或保存在-20℃或-80℃,但避免反復(fù)凍融。
  注意:樣品溶血會(huì)影響后期檢測(cè)結(jié)果,因此溶血樣品不應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。
  猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒使用相關(guān)問(wèn)題解析:
  1、試劑選擇:試劑在檢測(cè)前應(yīng)提前半小時(shí)在室溫下解凍。
  2、加樣過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題:當(dāng)使用血清或血漿作為檢測(cè)試劑時(shí),血清和血漿難以分離。這時(shí)候的解決辦法是在室溫下放置1~2小時(shí),然后離心。
  3、洗盤(pán)容易出錯(cuò):因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)。
  4、顯色問(wèn)題:使用過(guò)期的顯影劑或顯影劑使用后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可能導(dǎo)致顯影劑不顯色。因此,在進(jìn)行顯色反應(yīng)時(shí),首先要檢查顯影液本身的狀況。
  5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。
  6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。
 

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