轉(zhuǎn)染操作可將小干擾RNA（siRNA）直接遞送至細(xì)胞中。X-tremeGENE siRNA轉(zhuǎn)染試劑是一種脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，為向動物細(xì)胞中遞送siRNA提供了一種方便、可靠和高效的途徑，便于用戶進(jìn)行基因敲除后的細(xì)胞及功能學(xué)研究。

這一創(chuàng)新型試劑能夠與siRNA以及siRNA和質(zhì)粒的混合物（共轉(zhuǎn)染的情況下）形成復(fù)合物，并有效遞送這些核酸進(jìn)入細(xì)胞，以介導(dǎo)基因沉默。只需簡單的幾步就可完成轉(zhuǎn)染：首先將轉(zhuǎn)染試劑與稀釋過的siRNA混合并孵育，之后將復(fù)合物直接加入細(xì)胞培養(yǎng)物中。由于X-tremeGENE siRNA轉(zhuǎn)染試劑在有無血清的條件下均工作良好，且經(jīng)論證無明顯細(xì)胞毒性，因此無需更換培養(yǎng)基。本品不含任何動物源性成份。

組分

本試劑經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，聚丙烯小管包裝。

應(yīng)用

X-tremeGENE siRNA 轉(zhuǎn)染試劑能夠有效將短干擾RNA（siRNAs）轉(zhuǎn)入許多種常用細(xì)胞，包括HeLa，NIH 3T3，HEK-293，CHO-K1，和COS-7和一些難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，比如HT29，一種人腺癌細(xì)胞系。

特點(diǎn)和優(yōu)勢

-在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。

-高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。

-細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。

-兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液（如無血清培養(yǎng)基）。;

X-tremeGENE siRNA轉(zhuǎn)染試劑是一款包含脂質(zhì)體及其他組份的zhuanli混合試劑，無動物源成分。

質(zhì)量

活性分析：將X-tremeGENE siRNA轉(zhuǎn)染試劑（1 - 2.5 μl）與特異性靶向HPRT看家基因的siRNA（0.1 - 0.35 μg）相互混合。在含10%胎牛血清（FBS）的條件下，將此混合物用于轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞（生長密度為30-50%的單層細(xì)胞）。轉(zhuǎn)染后通過LightCycler®實(shí)時(shí)熒光定量PCR來檢測細(xì)胞中HPRT mRNA水平的降低情況。測得的mRNA數(shù)據(jù)顯示，觀察到的敲除效率通常處于70-95%。

細(xì)胞毒性分析：HEK-293細(xì)胞暴露于siRNA/X-tremeGENE siRNA試劑混合物中72小時(shí)，未對含有血清的培養(yǎng)基進(jìn)行換液。之后通過WST-1細(xì)胞增殖試劑（Roche）分析細(xì)胞，以測試細(xì)胞毒性。