產(chǎn)品簡介

活性氧引起的許多生理損傷都可能歸因于單線態(tài)氧（1O2），包括與脫氧鳥苷選擇性反應(yīng)形成8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）的核酸修飾。單線態(tài)氧的壽命足夠長（水中有4.4μs）使其能夠充分?jǐn)U散進(jìn)入細(xì)胞和組織。實(shí)驗(yàn)室中通常用三種之一的方法來生成單線態(tài)氧：1）使用感光染料對二氧（3O2）進(jìn)行光化學(xué)反應(yīng)來制備；2）通過對一種過氧化物或二氧環(huán)丁烷進(jìn)行加熱分解制備；3）氧氣流內(nèi)通過微波放電來制備；單線態(tài)氧通過在1270nm處具弱化學(xué)發(fā)光的典型特征直接被檢測。

我司提供的Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG是目前商業(yè)化可得且應(yīng)用*泛的單線態(tài)氧熒光探針，從材料學(xué)到藥物學(xué)領(lǐng)域，比如光動力學(xué)療法。

產(chǎn)品特性

【特異性強(qiáng)】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG高度選擇性結(jié)合單線態(tài)氧（1O2）。不像其他的熒光和化學(xué)發(fā)光的單線態(tài)氧檢測試劑，SOSG與其他活性氧物質(zhì)（ROS），包括羥基自由基（·OH）、超氧陰離子（·O2–）和一氧化氮（NO）無可見反應(yīng)【見下圖】。

如圖、Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的熒光反應(yīng)和對單線態(tài)氧（1O2）的特異性。A）用熒光光度計(jì)（Ex/Em= 488/525nm）測定溶液內(nèi)的熒光，溶液內(nèi)含SOSG（1 µM ）和亞甲基藍(lán)（10 µM）溶于100mM pH 7.5 Tris Buffer; 單線態(tài)氧清除劑疊氮鈉（NaN3，1 mM）；或50% D2O（重水，能夠延長1O2的壽命）。每20s完成一次熒光測定，每次測定間隔30s（如灰條標(biāo)示）。在這30s的間隔中，樣本暴露于激光輻射（630–680 nm，<5 mW），導(dǎo)致亞甲基藍(lán)光敏生成1O2。B）用熒光光度計(jì)（Ex/Em=488/525nm）測定溶液內(nèi)的熒光，溶液為50mM pH 7 Tris buffer，1mM ，SOSG（1 µM ），或含SOSG（1 µM ），或含二氫羅丹明123。約20s之后，加入50 mU/mL氧化酶（XO）。XO催化的氧化，產(chǎn)生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬間被H2O2降解。

【熒光特征】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG與單線態(tài)氧（1O2）反應(yīng)前，探針最初發(fā)弱藍(lán)色熒光，激發(fā)峰在372nm和393nm，發(fā)射峰在395nm和416nm。當(dāng)含單線態(tài)氧（1O2），探針發(fā)射綠色熒光，光譜特征類似于熒光素（最大激發(fā)/發(fā)射波長約504/525nm）。

【線性化關(guān)系】

研究發(fā)現(xiàn)Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG的熒光產(chǎn)物在某些溶液中隨著時(shí)間被降解，且在不含單線態(tài)氧的堿性pH溶液中，Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG會發(fā)熒光。不過，當(dāng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)牟僮?，綠色熒光信號的強(qiáng)度與單線態(tài)氧（1O2）含量相關(guān)，且不會受其他ROS的明顯干擾。

【應(yīng)用】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG證實(shí)能用來檢測溶液和植物組織中的單線態(tài)氧（1O2）。

【使用方法】

1.SOSG儲存液制備：收到貨按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇來制備儲存液，每100µg粉末加入33µl甲醇制備~5mM儲存液。正式實(shí)驗(yàn)前制備工作液，不能用完的工作液需丟棄，不可保存后再用。

2.溶液檢測：SOSG不具細(xì)胞膜滲透性，設(shè)計(jì)用來檢測溶液環(huán)境內(nèi)的單線態(tài)氧。最佳的稀釋緩沖液和工作濃度需根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來調(diào)整。建議起始工作濃度為1-10µM。

【爭議點(diǎn)】

Singlet Oxygen Sensor Green®, SOSG不具有細(xì)胞膜滲透性，能用于細(xì)胞單線態(tài)氧（1O2）檢測。

此探針不具有細(xì)胞膜滲透性，適用于溶液體系單線態(tài)氧（1O2）檢測。然而，Gollmer A et al.報(bào)道SOSG能插入活哺乳動物細(xì)胞（文獻(xiàn)來源：Gollmer A et al. Singlet Oxygen Sensor Green®: photochemical behavior in solution and in a mammalian cell. Photochem Photobiol. 2011 May-Jun;87(3):671-9.）。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃℃密封保存。

注意事項(xiàng) ：為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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