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我們的Cell Meter™檢測試劑盒是一套用于監(jiān)測細胞生存力的工具。有多種參數(shù)可用于監(jiān)測細胞活力。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰siansuan（PS）的轉(zhuǎn)運來監(jiān)測細胞凋亡。在細胞凋亡中，PS轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。磷脂酰siansuan在細胞表面的出現(xiàn)是細胞凋亡的初始/中間階段的通用指標，可以在觀察形態(tài)變化之前進行檢測。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰siansuan（PS）的轉(zhuǎn)運來監(jiān)測細胞凋亡。該試劑盒使用我們專有的基于熒光小分子的Apopxin™PS傳感器，該傳感器以比膜聯(lián)蛋白V（Kd<10 nM）高得多的親和力特異性結(jié)合PS。與膜PS結(jié)合后具有藍色熒光。它可以以微孔板，顯微鏡和流式細胞儀的形式使用，而大多數(shù)其他商業(yè)凋亡檢測試劑盒只能與顯微鏡或流式細胞儀平臺一起使用。
| 熒光酶標儀 | |
| 激發(fā) | 405納米 |
| 發(fā)射 | 450納米 |
| 隔斷 | 420納米 |
| 推薦板 | 黑墻/透明底 |
| 儀器規(guī)格 | 底讀模式 |
| 成分A：Apopxin™紫羅蘭色450（100X儲備液） | 1小瓶（100 µL） |
| 組分B：測定緩沖液（4°C） | 1瓶（10毫升） |
用測試化合物制備細胞（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
加入等量的Apopxin™Violet 450工作溶液
在室溫下孵育1小時
監(jiān)視Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）的熒光強度（底部讀取模式）或使用裝有紫羅蘭色濾光片的熒光顯微鏡
重要說明
開始實驗之前，請在室溫下溫?zé)釡y定緩沖液（組分B）。
將10μL100X Apopxin™紫羅蘭色450（組分A）添加到1 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合以制成Apopxin™紫羅蘭色450工作溶液。注意： 100μLApopxin™Violet 450工作溶液足以用于一口井。使用前準備新鮮。
程序
通過向PBS或所需的緩沖液中加入10X /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X測試化合物儲備溶液來處理細胞。對于空白孔（不含細胞的培養(yǎng)基），添加相同量的化合物緩沖液。
將細胞板在5％CO 2和37°C的培養(yǎng)箱中孵育所需的時間（對于用星形孢菌素處理的Jurkat細胞，需要4-6小時）以誘導(dǎo)凋亡。注意：由于在405 nm激發(fā)時，從380至490 nm的寬發(fā)射光譜，某些化合物（例如xishujian）可能會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。
在每個孔中添加100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Violet 450工作溶液。
在避光條件下，于室溫下孵育細胞板至少1小時。
以800 rpm的速度離心細胞板（特別是非粘附細胞）2分鐘（制動）。
使用熒光酶標儀（底部讀取模式）在Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）或使用帶有紫色濾光片的熒光顯微鏡對圖像池進行熒光強度監(jiān)測。
Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *綠色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *紅色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Red Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit Cell Meter™磷脂酰siansuan凋亡檢測試劑盒 *深紅色熒光,適合微孔板檢測* Cell Meter™ Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit *Deep Red Fluorescence Optimized for Microplate Readers* 1 kit
