danjian及其代謝產(chǎn)物在細胞膜的結(jié)構(gòu)完整性和信號傳導(dǎo)以及danjian能神經(jīng)傳遞（乙酰danjian合成）中起著重要作用。它是通過其代謝產(chǎn)物*基ganansuan參與S-腺苷jialiuansuan合成途徑而獲得的甲基基團的主要來源。danjian缺乏癥可能導(dǎo)致肝臟疾病，動脈粥樣硬化以及可能的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。盡管danjian在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中作為乙酰danjian和膜磷脂酰danjian的前體具有重要意義，但對danjian在精神疾病中的作用卻鮮有研究。該Amplite™danjian定量試劑盒提供了靈敏的danjian定量方法之一。該試劑盒使用Amplite™Red量化danjian的濃度，這與danjian氧化酶介導(dǎo)的酶偶聯(lián)反應(yīng)中過氧化氫的產(chǎn)生有關(guān)。danjian的量與在酶偶聯(lián)反應(yīng)循環(huán)中形成的過氧化氫的濃度成比例。在存在過氧化物酶的情況下，Amplite™Red的熒光強度與過氧化氫的形成成比例，該過氧化氫轉(zhuǎn)化為danjian的濃度。該測定可以容易地用熒光酶標儀讀取。或者，也可以使用吸收酶標儀在?570 nm處讀取測定值。Amplite™Red的熒光強度與過氧化氫的形成成比例，該過氧化氫轉(zhuǎn)化為的danjian濃度。該測定可以容易地用熒光酶標儀讀取?；蛘?，也可以使用吸收酶標儀在?570 nm處讀取測定值。Amplite™Red的熒光強度與過氧化氫的形成成比例，該過氧化氫轉(zhuǎn)化為danjian的濃度。該測定可以容易地用熒光酶標儀讀取。或者，也可以使用吸收酶標儀在?570 nm處讀取測定值。

1. 準備并添加標danjian準品和/或測試樣品（50 µL）

2. 準備并添加danjian測定工作溶液（50 µL）

3. 在室溫下孵育15-60分鐘

4. 監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm時的熒光強度

重要說明
開始實驗之前，請在室溫下解凍所有試劑盒組件。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

1. Amplite™Red儲備液（250X）：
將40 µL DMSO（組分E）添加到Amplite™Red底物（組分A）的小瓶中。儲備溶液應(yīng)及時使用。應(yīng)將所有剩余的溶液等分，并在-20  ^o C重新冷凍。注意：避免重復(fù)凍融循環(huán)。注意：在硫醇（例如二硫蘇糖醇（DTT））存在下，Amplite™Red底物不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT的終濃度應(yīng)不高于10 µM。Amplite™Red底物在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH 7-8下進行。建議使用提供的測定緩沖液（pH 7.4）。

2.danjian標準儲備液（50 mM）：
將400 µL ddH ₂ O加入danjian標準液（組分C）的小瓶中，并充分混合。注意：未使用的danjian儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在-20 ^o C下儲存。

配制標準溶液

為了方便起見，請使用我們的系列稀釋計

將20 µLdanjian標準儲備液（50mM）添加到980 µL測定緩沖液（組分D）中，生成1000 µM標準溶液。注意：  稀釋的danjian標準溶液不穩(wěn)定，應(yīng)在4小時內(nèi)使用。將30 µL的1000 µM標準溶液加到970 µL的測定緩沖液（組分D）中，以生成30 µMdanjian標準溶液，然后進行1：3系列稀釋，以得到10、3、1、0.3、0.1、0.03和0 µMdanjian標準。（請參閱標準溶液制備中的鏈接）

準備工作溶液

danjian測定工作溶液：
將5 mL測定緩沖液（組分D）添加到danjian探針瓶（組分B）中，并充分混合。在danjian探針中加入20 µL Amplite Red™儲備溶液（250X）。