背景收起

Anti-DYKDDDDK-Tag Mouse mAb（瓊脂糖偶聯(lián)）是與瓊脂糖共價連接的單克隆抗DYKDDDDK抗體；瓊脂糖可對DYKDDDDK標(biāo)簽的蛋白進(jìn)行免疫沉淀（IP）或?qū)ζ湎嗷プ饔冒閭H進(jìn)行共免疫沉淀（Co-IP）。

來源收起

這種Abmart單克隆抗體是通過用含有表位DYKDDDDK（KLH偶聯(lián)）的合成肽免疫動物而產(chǎn)生的。

特異性收起

抗DYKDDDDK標(biāo)簽小鼠單克隆抗體可檢測到含有DYKDDDDK表位標(biāo)簽的轉(zhuǎn)染蛋白。

倉儲收起

產(chǎn)品以50％漿液的形式在存儲緩沖液（1 PBS，pH 7.4，含0.1％NaN）中提供。將產(chǎn)品存放在4°C且不要凍結(jié)。

反應(yīng)性收起

所有

申請收起

• IP寬帶

• 

同種型收起

小鼠IgG2b

推薦的洗脫緩沖液收起

0.2 Mganansuan，pH 2.5

免疫沉淀程序收起

可以在1.5 ml微量離心管或離心柱中進(jìn)行這項工作。
1.將試管或小瓶顛倒數(shù)次，以*重懸Anti-DYKDDDDK瓊脂糖。
2.使用寬口移液器吸頭將20-50 l 50％的Anti-DYKDDDDK瓊脂糖漿液添加到細(xì)胞裂解物中。
注意：裂解物應(yīng)該是新鮮的，對于表達(dá)良好的標(biāo)記蛋白，
200μl裂解物（200-500 g總蛋白）通常會產(chǎn)生良好的IP結(jié)果。
3.在溫和攪拌下于4°C孵育2小時至過夜。
4.用1 ml TBS緩沖液或裂解緩沖液（例如RIPA（50 mM Tris HCl，pH 7.4，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1％NP-40，0.5％脫氧膽酸鈉））洗滌磁珠，離心3分鐘2,000×g，棄去上清液。洗滌3次，避免在洗滌過程中丟失珠子。
5.洗脫DYKDDDDK標(biāo)記的蛋白。
選項1.用洗脫緩沖液洗脫。
向珠中添加30-50μl洗脫緩沖液，輕輕敲打試管以充分混合，立即離心3分鐘，非常小心地將上清液轉(zhuǎn)移至新管中（避免轉(zhuǎn)移任何珠）。
注意：每20μl洗脫緩沖液中加入1 l 1.5 M Tris，pH 9.0，立即中和洗脫液。
選項2.用DYKDDDDK肽洗脫
加入30-50μlDYKDDDDK肽溶液（在TBS緩沖液中100μg/ ml DYKDDDDK肽），輕輕敲打試管以充分混合，孵育10分鐘，離心3分鐘，然后將上清液轉(zhuǎn)移至新鮮的管子。TBS緩沖液：50 mM Tris HCl，150 mM NaCl，pH 7.4。
選項3.用SDS加載緩沖液洗脫
加入30μlX 2 SDS上樣緩沖液，輕輕敲打試管以充分混合，在100°C下煮沸5分鐘，離心3分鐘，然后將上清液轉(zhuǎn)移至新的試管中。
注意：在這種情況下，上清液不僅包含結(jié)合蛋白，
而且還包含IgG（重鏈和輕鏈）。
6.準(zhǔn)備用于蛋白質(zhì)印跡的SDS-PAGE凝膠或進(jìn)行其他測定。

配套產(chǎn)品收起

＃M20001 His-Tag（2A8）小鼠mAb
＃M20002 Myc-Tag（19C2）小鼠mAb
＃M20003 HA-Tag（26D11）小鼠mAb
＃M20004 GFP-Tag（7G9）小鼠mAb
＃M20007 GST-Tag（12G8）小鼠mAb
＃M20008 DYDDDDDK-Tag（3B9）小鼠單克隆抗體（綁定到與
Sigma Anti-FLAG？M2抗體相同的表位）
＃M20012抗Myc-Tag小鼠單克隆抗體（瓊脂糖結(jié)合）
＃M20013抗HA-Tag小鼠單克隆抗體（瓊脂糖結(jié)合）