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植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒,微板法
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植物葉綠素(chlorophyll)含量試劑盒,微板法
葉綠素含量是植物生長(zhǎng)過程中一個(gè)重要的生理指標(biāo),由于其對(duì)周圍環(huán)境很敏感,并與植 物的光合作用、營(yíng)養(yǎng)吸收等密切相關(guān),被廣泛作為植物生長(zhǎng)的常規(guī)測(cè)定指標(biāo)。

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本試劑盒僅供科研使用 1 葉綠素含量測(cè)定試劑盒說明書 (貨號(hào):WS1060W 微板法 96 ) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 葉綠素含量是植物生長(zhǎng)過程中一個(gè)重要的生理指標(biāo),由于其對(duì)周圍環(huán)境很敏感,并與植 物的光合作用、營(yíng)養(yǎng)吸收等密切相關(guān),被廣泛作為植物生長(zhǎng)的常規(guī)測(cè)定指標(biāo)。 根據(jù)葉綠素提取液對(duì)可見光譜的吸收,在 649nm 665nm 處測(cè)定葉綠素提取物的吸光 值,然后利用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出樣品中葉綠素 a 含量、葉綠素 b 含量、葉綠素總含量。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 試劑一 粉劑×1 4℃保存 乙醇(自備1000mL×1 4℃保存 抽提 Buffer 配制:(體積比)乙醇:蒸餾水=95:5 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板、天平、10mL 玻璃試管、錫箔紙、無水乙醇。 四、葉綠素含量的測(cè)定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí) 驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備 1)取新鮮植物葉片或其它綠色組織,去掉中脈。 2)稱約 0.1g 剪碎,用蒸餾水洗干凈,然后加入 1mL 抽提 Buffer,少量試劑一(約 50mg), 葉綠素對(duì)光敏感,務(wù)必在黑暗或弱光條件下充分研磨(難磨葉片可以添加少量石英砂助 磨),然后轉(zhuǎn)移至 10mL 玻璃試管。 3)用抽提 Buffer 沖洗研缽,將所有沖洗液及研缽中所有的綠色物質(zhì)轉(zhuǎn)入 10mL 玻璃試管, 用抽提 Buffer 補(bǔ)充至 10mL,玻璃試管置于黑暗條件下或者包上錫箔紙浸提 3h,觀察試 管底部組織殘?jiān)?全變白則提取*全,若組織殘?jiān)?全變白,繼續(xù)浸提至其*全變白。 2、上機(jī)檢測(cè) 分別取200μL浸提液和200μL抽提Buffer96孔板,記為測(cè)定管和空白管,分別于665nm 649nm 處讀取吸光值 A,△A 665=(A 測(cè)定-A 空白) 665,△A 649=(A 測(cè)定-A 空白) 649。 【注】:若吸光值 A 超過 1,待檢測(cè)的浸提液用抽提 buffer 稀釋,計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)。 五、結(jié)果計(jì)算: 葉綠素 a 含量(mg/g 鮮重)=Ca× D W V ? ? 1000 葉綠素 b 含量(mg/g 鮮重)=Cb× D W V ? ? 1000 葉綠素總含量(mg/g 鮮重)=CT× D W V ? ? 1000 Ca=13.95×A6656.88×A649 (mg/L)Cb=24.96×A6497.32×A665(mg/L); CT=6.63×A665+18.08×A649(mg/L)V---代表提取液體積,10mL; D---代表稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; W---代表樣本質(zhì)量,g



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