| 上海宇淳生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥1220-￥1950 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 1220元 | 1 盒 可售 |
| 96T | 1950元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-06-07 09:30:26瀏覽次數(shù)：325
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土壤N-乙酰-βD氨基葡萄糖苷酶試劑盒微板法
土壤N-乙酰-βD氨基葡萄糖苷酶試劑盒微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）試劑盒說(shuō)明書 （貨號(hào)：WS1230W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG，EC 3.2.1.52）是溶酶體中的一種酸性水解 酶，由土壤微生物分泌，該酶的活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。 土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）分解 4-硝基酚-β-N-乙酰氨基葡萄糖生成 對(duì)-硝基*酚（PNP），在 405nm 處檢測(cè)該產(chǎn)物的升高速率，來(lái)計(jì)算 S-NAG 活力大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 粉劑 mg×2 瓶 -20℃保存 臨用前甩幾下使粉體落入底部，每瓶 再加 7.6mL 蒸餾水，充分溶解備用， 用不完的試劑仍-20℃保存； 試劑二 液體 80mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 80mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋或恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、天平。 四、土壤 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（S-NAG）活性測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本的制備： 取新鮮土樣或干土（風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干），先粗研磨，過(guò) 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過(guò)篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 405nm。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 對(duì)照管 空白管（僅做一次） 土樣（g） 0.05 0.05 試劑一 150 150 蒸餾水 150 試劑二 300 300 300 混勻， 37℃（水浴鍋或恒溫培養(yǎng)箱）振蕩反應(yīng) 1h 試劑三 350 350 350 混勻，12000rpm，離心 10min，取上清液 200μL 于 96 孔板中，于 405nm 下讀取吸光值 A，△A=A 測(cè)定-A 對(duì)照-A 空白（每個(gè)測(cè)定管 需設(shè)一個(gè)對(duì)照管）。 【注】：1.若ΔA 在零附近徘徊，可延長(zhǎng) 37℃的孵育時(shí)間 T（如增至 4 小時(shí)或更長(zhǎng)），或增加 土樣質(zhì)量 W（如增至 0.2g）。則改變后的 T 和 W 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 2.若測(cè)定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1.5，可縮短 37℃的孵育時(shí)間 T（如減至 0.5 小時(shí)或更短）。 則改變后 T 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算?；?qū)ψ詈笠徊降拇龣z測(cè)上清液（包括測(cè)定管、對(duì)照管本試劑盒僅供科研使用 2 和空白管）同時(shí)用蒸餾水進(jìn)行稀釋，稀釋倍數(shù) D 代入計(jì)算公式。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0959x - 0.0056；x 為標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 為吸光值ΔA 。 2、單位定義：每小時(shí)每克土樣中產(chǎn)生 1nmol 對(duì)-硝基*酚（PNP）定義為一個(gè)酶活單位。 S-NAG 活力(nmol/h/g 土樣)=(ΔA+0.0056)÷0.0959÷Mr×103÷W÷T×D =75×(ΔA+0.0056) ÷W×D T---反應(yīng)時(shí)間，1h； W---實(shí)際稱取土樣質(zhì)量，g； Mr--- PNP 相對(duì)分子質(zhì)量，139.11； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5mg/mL。也可根據(jù)實(shí)際 樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在 EP 管中依次加入：20μL 標(biāo)準(zhǔn)品+130μL 蒸餾水+300μL 試劑二+350μL 試劑三，混 勻，取 200μL 至 96 孔板中，于 405nm 下讀取吸光值。 4 根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
