| 上海宇淳生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥2150 |
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型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 2150元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-05-30 11:28:32瀏覽次數(shù)：296
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土壤α-木糖苷酶試劑盒,微板法
土壤α-木糖苷酶試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤α-木糖苷酶（Solid-β- xylosidase）測定試劑盒說明書 （貨號：WS3330W 微板法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡介： α-木糖苷酶(EC 3.2.1.177)是一類木聚糖降解水解酶，存在于微生物等生物體，促使非 還原末端α-D-木糖殘基的水解，釋放出α-D-木糖。 土壤中α-木糖苷酶催化對硝基*酚-α-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基*酚（PNP），該產(chǎn)物在 405nm 處有特征吸收峰，通過測定 405nm 光吸收增加速率，即可計(jì)算土壤α-木糖苷酶活 性。 二、試劑盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 粉劑 mg×1 支 4℃保存 用前甩幾下使試劑落入底部， 再加 1.4mL 蒸餾水溶解備用。 試劑二 液體 6mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液 22mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、天平、低溫離心機(jī)、蒸餾水。 四、土壤α-木糖苷酶活性測定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本的制備： 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37℃烘箱風(fēng)干，先粗研磨，過 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對于實(shí)驗(yàn)的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 405nm。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱 測定管 對照管 土樣（g） 0.1 0.1 試劑一（μL） 25 蒸餾水 25 試劑二（μL） 55 55 混勻， 45℃振蕩反應(yīng) 30min 試劑三（μL） 220 220 混勻，12000rpm，離心 10min，取上清液 200μL 于 96 孔板中，405nm 下讀取吸光值 A，△A= A 測定- A 對照（每個樣本需做一個自身對照）。 【注】：1.若ΔA 過小，可以增加土樣量或延長保溫時間（如：60min 或更長），重新調(diào)整的 樣本量 W 和反應(yīng)時間 T 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 2.若 A 測定超過 1.5，可以減少土樣量或降低保溫時間（如：10min），重新調(diào)整的 樣本量 W 和反應(yīng)時間 T 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。本試劑盒僅供科研使用 2 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=0.2647x-0.0058；x 為標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 為吸光值ΔA。 2、單位定義：每小時每克土樣中產(chǎn)生 1μg 對-硝基*酚（PNP）定義為一個酶活力單位。 土壤α-木糖苷酶活性(μg/h/g 土樣)=(ΔA+0.0058)÷0.2647÷W÷T=7.56×(ΔA+0.0058)÷W T---反應(yīng)時間，30min=0.5h； W---實(shí)際稱取干土質(zhì)量，g； PNP 相對分子質(zhì)量---139.11。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1ml 蒸餾水。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5mg/mL。也可根據(jù)實(shí)際 樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在 EP 管加入：20μL 標(biāo)準(zhǔn)品+5μL 蒸餾水+55μL 試劑二+220μL 試劑三，混勻，取 200μL 至 96 孔板中，于 405nm 下讀取吸光值。 4 根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
