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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 Mouse Beta-Defensins, Beta-DF  小鼠β-防御素 96T

MrpL39： 線粒體核糖體蛋白L39 0.1ml

Rhesus antibody Rh IgG/PE PE標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

sm Actinin- Alpha(Mouse skeletal muscle Actinin- Alpha)  小鼠橫紋肌輔肌動蛋白αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

AKAP5： A激酶錨定蛋白5抗體 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1

HSP90 alpha： 熱休克蛋白90α抗體 兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF 肝癌細胞，Hep 3B2.1-7細胞 IR983F細胞，大鼠骨髓瘤細胞

CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細胞裂解液 (陽性對照) 人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA 試劑盒 ATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復制因子2(多肽) 0.5mg

HFREP1： 肝細胞源性纖維蛋白原相關蛋白1抗體 CL-0454TE-11(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2

SHG-44細胞，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 霉 人淋巴內(nèi)皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg 人抗核周因子抗體(APF)ELISA 試劑盒 phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 0酸化活化復制因子2抗原 0.5mg

Hemogen： 紅細胞分化相關基因蛋白抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

caki-1人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞HGC-27 人胃癌細胞(未分化) 大鼠肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 t-PA  大鼠組織型纖溶酶原激活劑 96T

PGC1 beta： 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 NCI-H838[H838]細胞，人肺癌細胞 人肺腺癌細胞,A2細胞 腦靜脈血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠肌生成抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby) 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體 CL-0152MDA-MB-453(人癌細胞)5×106cells/瓶×2

HuT 78人T淋巴細胞白血病細胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS 大鼠肌肉生長抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 CA(Mouse catecholamine) 小鼠兒茶酚胺 96T

Prion protein PrP/CD230： 朊病毒蛋白CD230抗體 HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照)