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上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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更新時間：2024-11-23 11:35:05瀏覽次數(shù)：718
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K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購信息儲存條件：-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，*次使用前做預(yù)實驗確定所加質(zhì)粒的量），用手管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10；質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染，轉(zhuǎn)化效率急劇下降；質(zhì)粒增大一倍，轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時，由于營養(yǎng)不足，陽性克隆生長變慢，菌落變小，為了獲得大的菌落，應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml，過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌；根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失，但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作，所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素，Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
SAA 大鼠血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T
GMP-140 大鼠血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T
HO-2 大鼠血紅素氧合酶2 規(guī)格： 48T/96T
HO-1 大鼠血紅素氧合酶1 規(guī)格： 48T/96T
ADAMTS13/vWF-cp 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T
VWF 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格： 48T/96T
BK 大鼠血管舒緩激肽 規(guī)格： 48T/96T
ANG-R-Tie2 大鼠血管生成素受體Tie2 規(guī)格： 48T/96T
ANG-R-Tie1 大鼠血管生成素受體Tie1 規(guī)格： 48T/96T
ANG-4 大鼠血管生成素4 規(guī)格： 48T/96T
ANG-2 大鼠血管生成素2 規(guī)格： 48T/96T
ANG-1 大鼠血管生成素1 規(guī)格： 48T/96T
ANG 大鼠血管生長素 規(guī)格： 48T/96T
VCAM-1/CD106 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T
VEGFR-2 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2 規(guī)格： 48T/96T
VEGFR-1 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-D 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子D 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-C 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C 規(guī)格： 48T/96T
VEGF-B 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B 規(guī)格： 48T/96T
VEGF 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T
ACE 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 規(guī)格： 48T/96T
aGT 大鼠血管緊張素原 規(guī)格： 48T/96T
ANG-Ⅱ 大鼠血管緊張素Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T
Ang-Ⅰ 大鼠血管緊張素Ⅰ 規(guī)格： 48T/96T
VIP 大鼠血管活性腸肽 規(guī)格： 48T/96T
BrdU 大鼠溴脫氧核苷 規(guī)格： 48T/96T
ASD 大鼠雄烯二酮 規(guī)格： 48T/96T
Smad7 大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7 規(guī)格： 48T/96T
Smad1 大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子 規(guī)格： 48T/96T
NN-T4 大鼠新生甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA Kit，48T/96T 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
CT-1 大鼠心肌營養(yǎng)素1 規(guī)格： 48T/96T
cTnT 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T 規(guī)格：
