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上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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更新時間：2024-11-23 08:47:34瀏覽次數(shù)：523
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OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購信息儲存條件：-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，*次使用前做預(yù)實驗確定所加質(zhì)粒的量），用手管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10；質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機物污染，轉(zhuǎn)化效率急劇下降；質(zhì)粒增大一倍，轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時，由于營養(yǎng)不足，陽性克隆生長變慢，菌落變小，為了獲得大的菌落，應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml，過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計算轉(zhuǎn)化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌；根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失，但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作，所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮這些抗生素，Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
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小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 :英文名稱; hepatocyte growth factor,HGF ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒廠家 小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒報價
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 :英文名稱; Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒廠家 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒報價
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小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 :英文名稱; interleukin 12,IL-12/P40 ELISA KIT 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒廠家 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒報價
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 :英文名稱; Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒廠家 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒報價
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒 :英文名稱; Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; OrigamiB(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*1096T/48T 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒廠家 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒報價
小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 :英文名稱; Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit 購買我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好等優(yōu)點已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專門的售后部門對您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 小鼠型纖溶酶原激活物受體
