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上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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更新時(shí)間：2024-11-23 07:52:46瀏覽次數(shù)：490
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BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件：-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無(wú)抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10；質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染，轉(zhuǎn)化效率急劇下降；質(zhì)粒增大一倍，轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
BL21(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽(yáng)性克隆密度過(guò)大時(shí)，由于營(yíng)養(yǎng)不足，陽(yáng)性克隆生長(zhǎng)變慢，菌落變小，為了獲得大的菌落，應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml，過(guò)高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng)，會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan，若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌；根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失，但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作，所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素，Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
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大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專(zhuān)門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒廠家 大鼠甲狀旁腺激素(PTH) ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
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大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 :英文名稱; Rat β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit 購(gòu)買(mǎi)我公司ELISA試劑盒保證質(zhì)量，靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可，您可放心，且我司有專(zhuān)門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。 :規(guī)格; 96T/48T 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒廠家 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒報(bào)價(jià)
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