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上海博湖生物科技有限公司
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ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見(jiàn)辦法
2021-8-11 閱讀(3001)
ELISA實(shí)驗(yàn)是科研人員經(jīng)常用到的實(shí)驗(yàn)方法。很多人覺(jué)得ELISA很簡(jiǎn)單，其實(shí)不然。現(xiàn)在我們一起了解下ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見(jiàn)辦法。
實(shí)驗(yàn)原理：
1.包被：抗原/抗體，固相化
2.反響： 1)待測(cè)抗體/抗原； 2)酶標(biāo)抗原/抗體
3.洗滌：使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離
4.底物顯色：定性/定量剖析
常用辦法：
1. 間接法
檢測(cè)抗體常用的辦法, 首要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)。
優(yōu)勢(shì)：二抗能夠加強(qiáng)信號(hào)，并且有多種挑選能做不同的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反響性。
缺陷：交互反響發(fā)生的機(jī)率較高
2. 雙抗體夾心法
檢測(cè)大分子抗原常用的辦法。
優(yōu)勢(shì)：高活絡(luò)、高專(zhuān)一性，抗原無(wú)須事前純化。
缺陷：抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
3. 競(jìng)爭(zhēng)法
檢測(cè)小分子半抗原（藥物、激素等）。
優(yōu)勢(shì)：可適用比較不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
缺陷：全體的敏感性和專(zhuān)一性都較差。
